Kombinace separačních technik a hmotnostní spektrometrie pro proteomickou analýzu ječmene
Ječmen je důležitou zemědělskou plodinou používanou k přípravě sladu, jedné z výchozích surovin při výrobě piva. Chemické složení ječmene tak ovlivňuje výsledné vlastnosti tohoto hospodářsky významného nápoje. Jedním ze sledovaných parametrů ječmene je jeho proteinový obsah. Tato diplomová práce se...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2010
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/78285/prif_m/ |
| Shrnutí: | Ječmen je důležitou zemědělskou plodinou používanou k přípravě sladu, jedné z výchozích surovin při výrobě piva. Chemické složení ječmene tak ovlivňuje výsledné vlastnosti tohoto hospodářsky významného nápoje. Jedním ze sledovaných parametrů ječmene je jeho proteinový obsah. Tato diplomová práce se zabývá charakterizací a porovnáním obsahu vodorozpustných proteinů obsažených v zrnu a sladu ječné sladovnické odrůdy Jersey. K tomu byla využita kombinace 2D gelové elektroforézy, enzymatického štěpení vybraných proteinů a jejich identifikace pomocí MALDI-TOF MS a MS/MS analýz a následného databázového vyhledávání. Jedním z cílů byla také detekce proteinů modifikovaných glykosylací, která významně ovlivňuje vlastnosti proteinů. K dosažení tohoto cíle bylo použito afinitní chromatografie následované SDS-PAGE, enzymovým štěpením a MALDI-TOF MS a MS/MS analýzou. Použitím metody zahrnující dvourozměrnou gelovou elektroforézu byly identifikovány jak proteiny přežívající sladování (např. Barley is an important agricultural crop mainly used for the production of malt, one of the key ingredients for brewing beer. Therefore, the chemical composition of barley affects the resulting properties of beer. Barley protein composition is one of widely studied aspects, which is also the focus of this master's thesis. The goals of this thesis were to characterize and compare water-soluble proteins found in grain and malt, and to detect and identify proteins modified by glycosylation, which gives proteins unique properties. To achieve these goals, the combination of two-dimensional gel electrophoresis, one-dimensional gel electrophoresis and affinity chromatography were employed as the separation methods. The identification and characterization of selected proteins was carried out by MALDI-TOF MS and MS/MS analyses followed by database searching. The use of two-dimensional gel electrophoresis led to the identification of both proteins surviving the malting process (e.g. glyceraldeh |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Markéta Laštovičková |
| Fyzický popis: | 77 l. |