Analýza glykoproteinů pomocí hmotnostní spektrometrie

Předmětem diplomové práce je problematika analýzy glykoproteinů pomocí MALDI-TOF MS. Koncentrační rozsah glykoproteinů v biologickém materiálu, který může být až 12 řádů, není schopna současná instrumentace využívaná pro proteomiku pokrýt. Problémem může být také potlačení ionizace glykoproteinů/gly...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Bočánek, Ondřej (Autor práce)
Další autoři: Šedo, Ondrej, 1979- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2014
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/356502/prif_m/
Obálka
LEADER 04836ctm a22007097a 4500
001 MUB01000999975
003 CZ BrMU
005 20160603111107.0
008 140619s2014 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-12-14 
035 |a (ISMU-VSKP)237634 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 577  |x Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 543.51  |2 MRF 
080 |a 577.112.85  |2 MRF 
100 1 |a Bočánek, Ondřej  |* [absolvent PřírF MU]  |% UČO 356502  |4 dis 
242 1 0 |a Mass spectrometry analysis of glycoproteins  |y eng 
245 1 0 |a Analýza glykoproteinů pomocí hmotnostní spektrometrie  |h [rukopis] /  |c Ondřej Bočánek 
260 |c 2014 
300 |a 84 l. :  |b il. 
500 |a Vedoucí práce: Ondrej Šedo 
502 |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2014 
520 2 |a Předmětem diplomové práce je problematika analýzy glykoproteinů pomocí MALDI-TOF MS. Koncentrační rozsah glykoproteinů v biologickém materiálu, který může být až 12 řádů, není schopna současná instrumentace využívaná pro proteomiku pokrýt. Problémem může být také potlačení ionizace glykoproteinů/glykopeptidů jako minoritní složky vzorku. Z toho důvodu je důležitá jejich frakcionace. Cílem této práce bylo nalézt vhodný frakcionační postup pro analýzu rostinných glykoproteinů. Jako testovací vzorek byl vybrán izolát patatinů (zásobních proteinů z brambor), u kterých byla prokázána přítomnost N-glykosylace. Nejdříve byla vybrána vhodná MALDI matrice pro analýzu glykopeptidů. Poté byly v práci testovány komerční frakcionační kity od společností Novagen, GE Healtcare a Clontech, které však nepřinesly očekávané výsledky. Následně byl otestován postup FASP/FACE s využitím různých lektinů: concanavalinu A, AFL (izolován z Aspergillus fumigatus), RSL (izolován z Ralstonia solanacearum) a BclA (  |% cze 
520 2 9 |a This thesis is focused on the analysis of glycoproteins using MALDI TOF MS. Concentration range of glycoproteins in the biological material can be up to 12 orders of magnitude and it is impossible to cover this range with instrumentation currently used in proteomic research. The suppressed ionization of glycoproteins/glycopeptides can also be a problem, as they are minor constituents of the sample. It is therefore necessary to fractionate them. The aim of this work was to find a suitable fractionation procedure for the analysis of plant glycoproteins. As the test sample, an isolate of patatins (potato storage N-glycosylated protein) was selected. First, a suitable MALDI matrix was chosen for the analysis of glycopeptides. Then, the commercial fractionation kits produced by Novagen, GE Healtcare and Clontech were tested, however, they did not yield expected results. Subsequently, the procedure of FASP/FACE was tested, using different lectins: concanavalin A, AFL (isolated from Aspergill  |9 eng 
655 7 |a diplomové práce  |7 fd132022  |2 czenas 
658 |a Biochemie  |b Biochemie  |c PřF N-BCH BIOCH (BIOCH)  |2 CZ-BrMU 
650 0 2 |a Glycopeptides 
650 0 2 |a Glycosylation 
650 0 2 |a Lectins 
650 0 7 |a concanavalin  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a glykosylace  |2 czmesh 
650 0 7 |a glykopeptidy  |2 czmesh 
650 0 7 |a glykoproteiny  |7 ph318926  |2 czenas 
650 0 7 |a hmotnostní spektrometrie  |7 ph120763  |2 czenas 
650 0 7 |a lektiny  |2 czmesh 
650 0 7 |a MALDI-TOF MS  |2 CZ-BrMU 
650 0 9 |a glycoproteins  |2 eczenas 
650 0 9 |a mass spectroscopy  |2 eczenas 
700 1 |a Šedo, Ondrej,  |d 1979-  |7 xx0122934  |% UČO 13589  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Přírodovědecká fakulta  |7 kn20010709281  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/356502/prif_m/ 
CAT |c 20140619  |l MUB01  |h 0421 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140911  |l MUB01  |h 1202 
CAT |c 20140911  |l MUB01  |h 1614 
CAT |c 20140912  |l MUB01  |h 1108 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20141013  |l MUB01  |h 0931 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150302  |l MUB01  |h 1452 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1452 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1413 
CAT |a PTICHAX  |b 02  |c 20151102  |l MUB01  |h 2156 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0501 
CAT |a PUTNOVAX  |b 02  |c 20160603  |l MUB01  |h 1111 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160906  |l MUB01  |h 1230 
CAT |c 20201214  |l MUB01  |h 1120 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1010 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1957 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1229 
CAT |c 20230310  |l MUB01  |h 1117 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-12-14 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-K-12346  |5 3285006876  |8 20141013  |f 71  |f Prezenční SKLAD  |r 20141013  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-K-12346  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD