Příprava a charakterizace polyklonálních protilátek proti pod-jednotkám pozitivních elongačních faktorů
V této diplomové práci se věnuji testování polyklonálních protilátek z králičích sér (CDK13-C, CDK13-N, CycK-1-61) a kozího séra (CDK13-532) pro metody Western blot, imunoprecipitace, nepřímé imunofluorescence a imunohistochemie. Tato polyklonální séra byla připravena proti cyklinu K a kináze CDK13....
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2013
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/268966/prif_m/ |
| LEADER | 05382ctm a22008057a 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | MUB01000862661 | ||
| 003 | CZ BrMU | ||
| 005 | 20210720134034.0 | ||
| 008 | 130615s2013 xr ||||| |||||||||||cze d | ||
| STA | |a POSLANO DO SKCR |b 2020-10-05 | ||
| 035 | |a (ISMU-VSKP)210593 | ||
| 040 | |a BOD114 |b cze |d BOD035 | ||
| 072 | 7 | |a 616 |x Patologie. Klinická medicína |2 Konspekt |9 14 | |
| 080 | |a 616-092.19:54 |2 MRF | ||
| 080 | |a 616-097 |2 MRF | ||
| 100 | 1 | |a Sklenářová, Martina |% UČO 268966 |* [absolvent PřírF MU] |4 dis | |
| 245 | 1 | 0 | |a Příprava a charakterizace polyklonálních protilátek proti pod-jednotkám pozitivních elongačních faktorů |h [rukopis] / |c Martina Sklenářová |
| 246 | 1 | 1 | |a Preparation and characterization of polyclonal antibodies against parts of positive elongation factors |
| 246 | 1 | 0 | |a Generation and characterization of polyclonal antibodies against parts of positive elongation factors |
| 260 | |c 2013 | ||
| 300 | |a 50 l. : |b il. | ||
| 500 | |a Vedoucí práce: Jiří Kohoutek | ||
| 502 | |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2013 | ||
| 520 | 2 | |a V této diplomové práci se věnuji testování polyklonálních protilátek z králičích sér (CDK13-C, CDK13-N, CycK-1-61) a kozího séra (CDK13-532) pro metody Western blot, imunoprecipitace, nepřímé imunofluorescence a imunohistochemie. Tato polyklonální séra byla připravena proti cyklinu K a kináze CDK13. Důvodem byl fakt, že v období zadání diplomové práce, nebyly komerčně dostupné protilátky proti cycklinu K a CDK13. Proteiny cyklin K a CDK13 obecně hrájí klíčovou roli v regulaci elongační fáze eukaryotické transkripce, která se zdá být zcela zásadním kontrolním bodem v procesu eukaryotické transkripce. Vlastní charakterizace sér byla provedena jak na lidských buňkách HCT116, U2OS tak i myších kmenových buňkách R1. Ukázala jsem, že séra pro CDK13 se dají využít k detekci proteinové hladiny a k precipitaci endogenní CDK13 v lidských a myších buňkách. Dále jsme prokázala, že sérum CycK-1-61 není vhodné pro detekci proteinové hladiny cyklinu K v lidských a myších buňkách, ale dá se použít k p |% cze | |
| 520 | 2 | 9 | |a This thesis is focused on testing the polyclonal antibodies from rabbit sera (C-CDK13, CDK13-N-CycK 1-61) and goat serum (CDK13-532) in use of Western blot, immunoprecipitation, indirect immunofluorescence and immunohistochemistry. The polyclonal sera were prepared against cyclin K and kinase CDK13. The reason was the fact that at the beginning the diploma work, there were not commercially available antibodies against cycklin K and CDK13. Proteins cyclin K and CDK13 generally play a key role in the regulation of eukaryotic transcription elongation phase, which seems to be quite a major control point in the process of eukaryotic transcription. Own characterization of sera was performed on both human HCT116 cells, U2OS and mouse stem cells R1. I showed that the serum for CDK13 can be used to detect protein levels and precipitation of endogenous CDK13 in human and murine cells. Furthermore, we demonstrated that serum CycK-1-61 is suitable for the detection of protein levels of cyclin K in |9 eng |
| 655 | 7 | |a diplomové práce |7 fd132022 |2 czenas | |
| 658 | |a Biochemie |b Biochemie |c PřF N-BCH BIOCH (BIOCH) |2 CZ-BrMU | ||
| 650 | 0 | 2 | |a Blotting, Western |
| 650 | 0 | 2 | |a Cyclin-Dependent Kinases |
| 650 | 0 | 2 | |a Immunoprecipitation |
| 650 | 0 | 7 | |a western blotting |2 czmesh |
| 650 | 0 | 7 | |a cyklin-dependentní kinasy |2 czmesh |
| 650 | 0 | 7 | |a imunochemie |7 ph138255 |2 czenas |
| 650 | 0 | 7 | |a imunoprecipitace |2 czmesh |
| 650 | 0 | 7 | |a polyklonální protilátky |2 CZ-BrMU |
| 650 | 0 | 7 | |a protilátky |7 ph134994 |2 czenas |
| 650 | 0 | 7 | |a P-TEFb |2 CZ-BrMU |
| 650 | 0 | 9 | |a antibodies |2 CZ-BrMU |
| 650 | 0 | 9 | |a antibodies |2 eczenas |
| 650 | 0 | 9 | |a immunochemistry |2 eczenas |
| 700 | 1 | |a Kohoutek, Jiří, |d 1976- |7 xx0018618 |% UČO 19829 |4 ths | |
| 710 | 2 | |a Masarykova univerzita. |b Přírodovědecká fakulta |7 kn20010709281 |4 dgg | |
| 856 | 4 | 1 | |u http://is.muni.cz/th/268966/prif_m/ |
| CAT | |c 20130615 |l MUB01 |h 0421 | ||
| CAT | |a FOLTYNOVA |b 02 |c 20131031 |l MUB01 |h 1132 | ||
| CAT | |a FOLTYNOVA |b 02 |c 20131101 |l MUB01 |h 1000 | ||
| CAT | |c 20140911 |l MUB01 |h 1611 | ||
| CAT | |c 20140912 |l MUB01 |h 1106 | ||
| CAT | |c 20150703 |l MUB01 |h 1222 | ||
| CAT | |c 20150901 |l MUB01 |h 1450 | ||
| CAT | |c 20150921 |l MUB01 |h 1411 | ||
| CAT | |a BATCH |b 00 |c 20151226 |l MUB01 |h 0406 | ||
| CAT | |a FOLTYNOVA |b 02 |c 20160916 |l MUB01 |h 1434 | ||
| CAT | |a HANAV |b 02 |c 20161129 |l MUB01 |h 1446 | ||
| CAT | |a HANAV |b 02 |c 20161129 |l MUB01 |h 1456 | ||
| CAT | |a HANAV |b 02 |c 20161129 |l MUB01 |h 1609 | ||
| CAT | |c 20170119 |l MUB01 |h 1537 | ||
| CAT | |c 20180202 |l MUB01 |h 1041 | ||
| CAT | |a HANAV |b 02 |c 20180813 |l MUB01 |h 1159 | ||
| CAT | |c 20200306 |l MUB01 |h 1846 | ||
| CAT | |c 20201005 |l MUB01 |h 1143 | ||
| CAT | |c 20210121 |l MUB01 |h 1011 | ||
| CAT | |c 20210614 |l MUB01 |h 1004 | ||
| CAT | |c 20210614 |l MUB01 |h 1952 | ||
| CAT | |a REPISOVA |b 02 |c 20210720 |l MUB01 |h 1340 | ||
| CAT | |c 20230310 |l MUB01 |h 1117 | ||
| LOW | |a POSLANO DO SKCR |b 2020-10-05 | ||
| 994 | - | 1 | |l MUB01 |l MUB01 |m VYSPR |1 KUK |a Knihovna univ. kampusu |2 SKLAD |b KUK - sklad |3 PřF-K-9391 |5 3285005958 |8 20131101 |f 71 |f Prezenční SKLAD |r 20131101 |s převod |
| AVA | |a MED50 |b KUK |c KUK - sklad |d PřF-K-9391 |e available |t K dispozici |f 1 |g 0 |h N |i 0 |j SKLAD | ||