Separace a prekoncentrace peptidů a proteinů elektroforetickými metodami (Izoelektrická fokusace bez nosiče, = CAF-IEF, dvourozměrná CE, frakcionace)

Hmotnostní spektrometrie se stále více využívá při analýze složených proteomických vzorků. Před vlastním MS měřením je často nutné vzorek preparovat kvůli odstranění rušivých vlivů matrice a k zakoncentrování analytů. K těmto účelům lze využít metodu CAF-IEF. V této práci byla metoda CAF-IEF provede...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Budilová, Jana, 1981- (Autor práce)
Další autoři: Pazourek, Jiří (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Angličtina
Vydáno: 2011
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/40829/prif_d/
Obálka
LEADER 06842ctm a22011297a 4500
001 MUB01000694010
003 CZ BrMU
005 20150618204614.0
008 111027s2011 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-02-17 
035 |a (ISMU-VSKP)219312 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
041 0 |a cze  |a eng 
072 7 |a 543  |x Analytická chemie  |2 Konspekt  |9 10 
080 |a 543  |2 MRF 
080 |a 543.545.2  |2 MRF 
080 |a 543.51  |2 MRF 
100 1 |a Budilová, Jana,  |d 1981-  |7 mzk2007411127  |% UČO 40829  |4 dis 
245 1 0 |a Separace a prekoncentrace peptidů a proteinů elektroforetickými metodami (Izoelektrická fokusace bez nosiče, = CAF-IEF, dvourozměrná CE, frakcionace)  |h [rukopis] /  |c Jana Budilová 
246 1 1 |a Separation and preconcentration of proteins and peptides by electrophoretic methods (Carrier ampholyte free isoelectric focusing, multidimensional capillary electrophoresis, fractionation) 
260 |c 2011 
300 |a 84 l. +  |e 15 l. příl. 
500 |a Vedoucí práce: Jiří Pazourek 
502 |a Dizertace (Ph.D.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2011 
520 2 |a Hmotnostní spektrometrie se stále více využívá při analýze složených proteomických vzorků. Před vlastním MS měřením je často nutné vzorek preparovat kvůli odstranění rušivých vlivů matrice a k zakoncentrování analytů. K těmto účelům lze využít metodu CAF-IEF. V této práci byla metoda CAF-IEF provedena na komerčně dodávaném přístroji EA 101 (Villa Labeco, Slovensko), který byl vybaven speciálně vyrobenou kolonou pro dávkování větších objemů vzorků (až do 0,5 ml). K CAF-IEF byl navrhnut nový kontinuální mód, který nevyžaduje výměnu elektrolytu s přerušením průchodu proudu. V tomto módu byla provedena fokusace nízkomolekulárního pI markeru (PIM 7,4) a roztoku 0,016 mg/ml myoglobinu nebo inzulínu, po té byly odebrány 5 µl frakce k off-line analýze. Celkový čas fokusace byl 66 minut. Koncentraci PIMu 7,4 ve frakci se podařilo zvýšit až 75 krát (stanoveno pomocí UV VIS spectrometru). Koncentrace myoglobinu ve frakci se zvýšila až 33 krát a inzulínu 10 krát. Kvalitativní identifikace ...  |% cze 
520 2 9 |a Mass spectrometry is being increasingly used for analysis of proteome complex samples. Sample preparation is often necessary to remove matrix interferences and to concentrate analytes prior to MS measurement. A useful method for this purpose is Carrier Ampholyte Free-Isoelectric Focusing (CAF-IEF). In this work CAF-IEF of ampholytes was performed on a commercial apparatus EA101 (Villa Labeco, Slovakia) equipped with a specially made column for samples of large volume (up to 0.5 mL). A new continuous mode without voltage interruption or electrolyte replacement was developed. In this mode, a low molecular mass pI marker (PIM 7.4) and low concentrations of myoglobin and insulin (0,016 mg/mL), respectively, were concentrated, and then 5-ul fractions collected for off-line analyses. The total time of focusing was 66 minutes. The concentration of PIM 7.4 in the fractions was increased up to 75 times (determined by UV-VIS spectrometry). The concentration in the fractions was increased up to ...  |9 eng 
650 0 7 |a elektroforetické metody  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a fokusace bez nosných amfolytů  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a frakcionace  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a hmotnostní spektrometrie  |7 ph120763  |2 czenas 
650 0 7 |a kapilární izoelektrická fokusace  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a kapilární izotachoforéza  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a kapilární zónová elektroforéza  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a prekoncentrace  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a semipreparace  |2 CZ-BrMU 
650 0 9 |a capillary isoelectric focusing  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a capillary isotachophoresis  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a capillary zone electrophoresis  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a carrier ampholyte free - isoelectric focusing  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a electrophoretic methods  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a fractionation  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a mass spectrometry  |2 eczenas 
650 0 9 |a mass spectroscopy  |2 eczenas 
650 0 9 |a preconcentration  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a semipreparation  |2 eCZ-BrMU 
655 7 |a disertace  |7 fd132024  |2 czenas 
655 9 |a dissertations  |2 eczenas 
658 |a Chemie (čtyřleté)  |c PřF D-CH4 ANAL  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Pazourek, Jiří  |7 xx0093311  |% UČO 2356  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav chemie  |7 kn20091218005  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/40829/prif_d/ 
CAT |c 20111027  |l MUB01  |h 0422 
CAT |a VASICEK  |b 02  |c 20120113  |l MUB01  |h 0932 
CAT |a batch  |b 00  |c 20120324  |l MUB01  |h 0152 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20130304  |l MUB01  |h 1319 
CAT |c 20140127  |l MUB01  |h 1915 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140515  |l MUB01  |h 1238 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140909  |l MUB01  |h 1206 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141120  |l MUB01  |h 0838 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141120  |l MUB01  |h 0857 
CAT |a PTICHAX  |b 02  |c 20150618  |l MUB01  |h 2043 
CAT |a PTICHAX  |b 02  |c 20150618  |l MUB01  |h 2046 
CAT |c 20150703  |l MUB01  |h 1153 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1448 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1409 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0216 
CAT |c 20160401  |l MUB01  |h 1129 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190110  |l MUB01  |h 1105 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190110  |l MUB01  |h 1120 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190110  |l MUB01  |h 1126 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190110  |l MUB01  |h 1142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190509  |l MUB01  |h 1046 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190509  |l MUB01  |h 1049 
CAT |c 20200217  |l MUB01  |h 1029 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20200522  |l MUB01  |h 0751 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20200522  |l MUB01  |h 0823 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20200522  |l MUB01  |h 0845 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20201104  |l MUB01  |h 2339 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20201105  |l MUB01  |h 0051 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20201105  |l MUB01  |h 1114 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 0956 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1944 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1209 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20221221  |l MUB01  |h 2229 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20221221  |l MUB01  |h 2240 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20221221  |l MUB01  |h 2253 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20230131  |l MUB01  |h 1921 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20231010  |l MUB01  |h 2243 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240122  |l MUB01  |h 1335 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240320  |l MUB01  |h 2349 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240506  |l MUB01  |h 1920 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240701  |l MUB01  |h 2150 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240715  |l MUB01  |h 0740 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-02-17 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-2011-K-8522  |5 3285004120  |8 20120113  |f 70  |f Prezenční  |r 20120113  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-2011-K-8522  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD