Optimalizace izolačních postupů volné fetální DNA z plazmy periferní krve těhotných žen
Existence volných (nebuněčných) fetálních forem nukleových kyselin v krvi těhotných žen a jejich detekce představuje možnosti na poli neinvazivní prenatální diagnostiky. Jedná se o poměrně novou metodu, u níž není zatím dosaženo standardu v laboratorním postupu. Hlavním problémem je obtížnost rutinn...
Uloženo v:
Hlavní autor: | |
---|---|
Další autoři: | |
Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
Jazyk: | Čeština |
Vydáno: |
2010
|
Témata: | |
On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/33343/lf_b/ |
Shrnutí: | Existence volných (nebuněčných) fetálních forem nukleových kyselin v krvi těhotných žen a jejich detekce představuje možnosti na poli neinvazivní prenatální diagnostiky. Jedná se o poměrně novou metodu, u níž není zatím dosaženo standardu v laboratorním postupu. Hlavním problémem je obtížnost rutinního testování díky velkému přebytku volné DNA maternálního původu nad volnou DNA fetálního původu v krvi matky. Tato práce představuje srovnání dvou různých principů izolace volné fetální DNA z krevní plazmy těhotných žen v prvním a druhém trimestru těhotenství. Pro porovnání byly měřeny koncentrace volné DNA pomocí spektrofotometrie a dále byla volná fetální DNA detekována a kvantifikována pomocí real-time PCR v lokusu SRY a také kapilární elektroforézou v lokusu AMELY. Presence of free cell fetal forms of nucleic acids in the blood of pregnant women and its detection presents us with new possibilities in the field of non-invasive prenatal diagnostics. It is a relatively new method, where no standardisation of laboratory proceedings has been achieved quite yet. The main problem is the difficulty of routine testing due to the fact that maternal blood contains considerable surplus of free DNA of maternal origin over free DNA of foetal origin. This article presents the comparison between two different principles of isolation of free foetal DNA from blood plasma of pregnant women during the first and second trimester of their pregnancy. For comparison reasons, concentration of free DNA was measured using spectrophotometry as well free foetal DNA was detected and quantified using „real-time PCR“ in „SRY“-locus and also using capillary electrophoresis in „AMELY“-locus. |
---|---|
Popis jednotky: | Vedoucí práce: R. Vodička |
Fyzický popis: | 63 l. |