Metody imobilizace proteinů na povrch mikrotitračních destiček

Cílem této bakalářské práce bylo porovnat klasickou pasivní adsorbci s kovalentní imobilizací proteinů na povrch různých mikrotitračních destiček a stripů. Dále byla porovnána vazba na povrch destičky potažený streptavidinem pro vazbu biotinylovaných molekul. Jako protilátka byla použita monoklonáln...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Riegelová, Kristýna (Autor práce)
Další autoři: Skládal, Petr, 1964- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2009.
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/211097/prif_b/
Obálka
LEADER 07286ctm a22013097a 4500
001 MUB01000588801
003 CZ BrMU
005 20091021084030.0
008 090625s2009 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2018-08-31 
035 |a (ISMU-VSKP)172146 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 577  |x Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 577.1  |2 MRF 
080 |a 616-097  |2 MRF 
080 |a 577  |2 MRF 
100 1 |a Riegelová, Kristýna  |% UČO 211097  |* [absolvent PřírF MU]  |4 dis 
242 1 0 |a Methods for immobilization of proteins on the surface of microtitration plates  |y eng 
245 1 0 |a Metody imobilizace proteinů na povrch mikrotitračních destiček  |h [rukopis] /  |c Kristýna Riegelová. 
260 |c 2009. 
300 |a 43 l. 
500 |a Vedoucí práce: Petr Skládal. 
502 |a Bakalářská práce (Bc.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2009. 
520 2 |a Cílem této bakalářské práce bylo porovnat klasickou pasivní adsorbci s kovalentní imobilizací proteinů na povrch různých mikrotitračních destiček a stripů. Dále byla porovnána vazba na povrch destičky potažený streptavidinem pro vazbu biotinylovaných molekul. Jako protilátka byla použita monoklonální protilátka AL01, albumin lidského séra a anti albumin. Nejprve bylo nutné protilátku naimobilizovat na povrch destiček. Protilátka byla zředěna karbonátovým pufrem na koncentrace 5 μg/ml a 20 μg/ml. Po inkubaci byla přidána enzymem značená sekundární protilátka IgG-HRP a HSA-HRP, která se navázala na protilátku. Množství navázaného konjugátu je pro tento test nejdůležitější. Peroxidáza byla kvantifikována přidáním 3,5,3‘,5‘-tetramethylbenzidinu jako substrátu s peroxidem vodíku. Enzymová reakce byla zastavena 2,5 M HCl a absorbance byla měřena při 450 nm. Absorbance je přímo úměrná množství navázaného konjugátu.  |% cze 
520 2 9 |a A target of this bachelor thesis was comparison of a classical passive coupling with covalent bonding of proteins on a surface of different microtiter plates and strips. The streptavidin coated plates was tested, this surface couples biotinylated molecules. The model interaction was represented by human serum albumin and anti albumin monoclonal antibody AL01. At first it was necessary to imobilize the antibody AL01 to the surface of microwells. Antibody was diluted in coating buffer at two different concentrations, 5 μg/ml and 20 μg/ml. Subsequently, after incubation and washing, enzym linked secondary antibody IgG-HRP or HSA-HRP conjugate was added, which was coupled to the primary antibody. Quantity of binding conjugate was the most important for this immunoassay. The surface-bound peroxidase was quantified using 3,5,3‘,5‘-tetramethylbenzidine as substrate with hydrogen peroxide. The enzym reaction was stopped by 2,5 M HCl and absorbance was measured at 450nm.  |9 eng 
650 0 7 |a antigeny  |7 ph134713  |2 czenas 
650 0 7 |a ELISA  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a imobilizace  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a mikrotitrační destička  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a protilátky  |7 ph134994  |2 czenas 
650 0 9 |a antibodies  |2 eczenas 
650 0 9 |a antigens  |2 eczenas 
655 7 |a bakalářské práce  |7 fd132403  |2 czenas 
658 |a Biochemie  |b Biochemie  |c PřF B-BCH BCHM (BCHM)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Skládal, Petr,  |d 1964-  |7 mub2010598931  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav biochemie  |7 ko2015866760  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/211097/prif_b/ 
CAT |c 20090625  |l MUB01  |h 0451 
CAT |a VASICEK  |b 02  |c 20091021  |l MUB01  |h 0840 
CAT |a BATCH-UPD  |b 02  |c 20091102  |l MUB01  |h 0715 
CAT |a BATCH-UPD  |b 02  |c 20091103  |l MUB01  |h 0211 
CAT |c 20091203  |l MUB01  |h 0232 
CAT |c 20091203  |l MUB01  |h 1915 
CAT |a BATCH-UPD  |b 00  |c 20091219  |l MUB01  |h 0815 
CAT |c 20100428  |l MUB01  |h 1013 
CAT |a BATCH-UPD  |b 00  |c 20100501  |l MUB01  |h 1215 
CAT |a VASICEKX  |b 02  |c 20100923  |l MUB01  |h 0807 
CAT |a BATCH-UPD  |b 02  |c 20100929  |l MUB01  |h 0335 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20110428  |l MUB01  |h 1453 
CAT |c 20110627  |l MUB01  |h 1916 
CAT |c 20110627  |l MUB01  |h 2325 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20111013  |l MUB01  |h 0942 
CAT |a batch  |b 00  |c 20120324  |l MUB01  |h 0126 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20120606  |l MUB01  |h 1321 
CAT |c 20120610  |l MUB01  |h 1947 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20120711  |l MUB01  |h 1429 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20120919  |l MUB01  |h 0940 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20130303  |l MUB01  |h 1110 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20130523  |l MUB01  |h 1249 
CAT |a VACOVAX  |b 02  |c 20131129  |l MUB01  |h 1005 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140114  |l MUB01  |h 1256 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140424  |l MUB01  |h 0832 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1640 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1645 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0911 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0923 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0924 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0929 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0800 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0803 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140909  |l MUB01  |h 1240 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0737 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0741 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0804 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0808 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150804  |l MUB01  |h 1558 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1444 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1405 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0023 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0814 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0815 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0817 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160905  |l MUB01  |h 1541 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20180312  |l MUB01  |h 1232 
CAT |c 20180831  |l MUB01  |h 1055 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1607 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1614 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1622 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 1814 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2020 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2033 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2141 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0146 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0151 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0208 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0734 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0738 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0741 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0745 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0748 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1137 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1141 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1155 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1435 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 0939 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1928 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1147 
CAT |a PTICHAX  |b 02  |c 20211029  |l MUB01  |h 1923 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2018-08-31 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-2009-K-7359  |5 3285002329  |8 20091021  |f 71  |f Prezenční SKLAD  |r 20091021  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-2009-K-7359  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD