Mutageneze proteinů vázajících sacharidy - účinný nástroj pro přípravu vysokoafinitních lektinů /
Cukry hrají v živé přírodě důležitou roli nejenom jako zdroj energie, ale jsou také důležitými součástmi různých proteinů a lipidů a v hojné míře jsou přítomny na površích buněk. Vzhledem ke svým vlastnostem se cukry často podílejí na interakcích na molekulární a buněčné úrovni. Proteiny, které inte...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština Angličtina |
| Vydáno: |
2018
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/wt9fy/ |
| Shrnutí: | Cukry hrají v živé přírodě důležitou roli nejenom jako zdroj energie, ale jsou také důležitými součástmi různých proteinů a lipidů a v hojné míře jsou přítomny na površích buněk. Vzhledem ke svým vlastnostem se cukry často podílejí na interakcích na molekulární a buněčné úrovni. Proteiny, které interagují s cukry vratně a s vysokou specifitou, se nazývají lektiny. Nepatří mezi protilátky a ani nemají žádnou katalytickou aktivitu. Mutageneze lektinů se využívá nejen pro detailní charakterizaci jejich vazebných vlastností ale také pro přípravu lektinů s pozměněnou specifitou a vylepšenou afinitou V rámci této disertační práce byla použita deleční mutageneze pro přípravu funkční varianty lektinu intelektinu 1 a místně cílená mutageneze pro přípravu mutantních variant lektinů patřících do nadrodiny PA IIL, aby mohly být detailně charakterizovány jejich vazebné vlastnosti. Dále byly optimalizovány metody, které by mohly být využity pro high-throughput screening knihoven mutantů, a to by umo In the living nature, sugars play an important role not only as a source of energy but they are also substantial constituent parts of various proteins and lipids, and therefore, they are abundantly present on cell surfaces. Due to their features, sugars are often involved in interactions at molecular and cell level. Proteins interacting with saccharides reversibly and with high specificity are called lectins. They do not belong to antibodies and they lack any catalytic activity. Mutagenesis approach is often utilized for detail characterization of lectin binding properties, and it is also used for preparation of lectins with modified specificity and improved affinity. In this PhD thesis, deletion mutagenesis was used to prepare functional variant of lectin intelectin 1, while site-directed mutagenesis was used to prepare mutant variants of lectins belonging to PA IIL superfamily for detail characterization of their binding properties. In addition, optimization of methods, which could b |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Michaela Wimmerová |
| Fyzický popis: | 93 stran, 156 stran příloh : ilustrace |