Elektrochemické ELISA metody /
Tato diplomová práce se věnuje vývoji elektrochemické ELISA (z angl. Enzyme-linked immunosorbent assay) metody stanovení nádorového supresoru proteinu p53 využitím mikroskopických magnetických částic a voltametrické detekce na tištěných uhlíkových elektrodách (SPCE). Protein p53 je klíčový v prevenc...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Angličtina |
| Vydáno: |
2018
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/orqlg/ |
| Shrnutí: | Tato diplomová práce se věnuje vývoji elektrochemické ELISA (z angl. Enzyme-linked immunosorbent assay) metody stanovení nádorového supresoru proteinu p53 využitím mikroskopických magnetických částic a voltametrické detekce na tištěných uhlíkových elektrodách (SPCE). Protein p53 je klíčový v prevenci rakoviny. Jeho mutované formy, nalézající se téměř u 50-ti % všech lidských typů nádorů, mohou být použity jako diagnostické markery jejich zhoubnosti. Proto je vývoji rychlé, jednoduché a citlivé metody jeho detekce věnována značná pozornost. Pro tyto účely byly v naší laboratoři připraveny SPCE, které byly elektrochemicky charakterizovány a jejich příprava optimalizována pomocí cyklické voltametrie a reverzibilního redoxního systému K4[Fe(CN)6]/K3[Fe(CN)6]. Optimalizovány byly také parametry sendvičové ELISA metody (koncentrace činidel/protilátek, pufrů i inkubační doby), která využívala primární protilátku DO-1 zachycenou na magnetických kuličkách, studovaný protein p53, biotinilovanou ... This thesis concerns with development of an electrochemical enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for determination of tumour suppressor protein p53 based on microscopic magnetic beads (MB) and voltammetric detection at screenprinted carbon electrodes (SPCE). Protein p53 is crucial in cancer prevention. Its mutated forms, found in almost 50% of human tumour types, can be used as diagnostic markers for malignancy. Consequently, development of a fast, simple and sensitive method for its detection is of high interest. Homemade disposable SPCE were electrochemically characterised and their construction was optimised by cyclic voltammetry and reversible redox system of K4[Fe(CN)6]/K3[Fe(CN)6]. Parameters (reagent concentrations, buffers and incubation times) of the sandwich ELISA system composed of MB with immobilised capture antibody DO-1, studied p53, biotinylated detection antibody Bp53-10 and streptavidin labelled alkaline phosphatase converting naphthyl phosphate to electrochemically ... |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Aleš Daňhel |
| Fyzický popis: | 44 listů |