Morfologie jaderné laminy a funkce jaderných laminů při reparaci DNA /
Tato diplomová práce je zaměřena na studium hladiny, uspořádání, počtu ohnisek a dynamiky jaderných proteinů HP1β (heterochromatin protein 1β), 53BP1 (p53-binding protein 1) a PCNA (proliferating cell nuclear antigen) podílejících se na opravě DNA v závislosti na přítomnosti funkčních složek jaderné...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2016
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/269463/prif_m/ |
| Shrnutí: | Tato diplomová práce je zaměřena na studium hladiny, uspořádání, počtu ohnisek a dynamiky jaderných proteinů HP1β (heterochromatin protein 1β), 53BP1 (p53-binding protein 1) a PCNA (proliferating cell nuclear antigen) podílejících se na opravě DNA v závislosti na přítomnosti funkčních složek jaderné laminy: laminů typu A a proteinu LAP2α (lamina-associated polypeptide 2α). Stanovení hladiny proteinů bylo provedeno metodou westernového přenosu a jaderné uspořádání proteinu 53BP1 bylo studováno pomocí imunofluorescence. K měření dynamiky fluorescenčně značených proteinů in vivo byla použita technika FRAP (fluorescence recovery after photobleaching), která je založená na sledování rychlosti obnovy fluorescence ve fotovybělené oblasti buněčného jádra. Bylo zjištěno, že se dynamika 53BP1 a HP1β liší v závislosti na lokalizaci v ohniscích a mimo ně. Při studiu vlivu UV záření na dynamiku proteinu HP1β nebyly zaznamenány žádné rozdíly oproti kontrolním buňkám. Po poškození DNA způsobeném ... This diploma thesis is focused on study of the level, arrangement, number of foci and dynamics of nuclear proteins HP1β (heterochromatin protein 1β), 53BP1 (p53-binding protein 1) and PCNA (proliferating cell nuclear antigen) involved in DNA repair in dependence on the presence of functional components of nuclear lamina: A-type lamins and LAP2α (lamina-associated polypeptide 2α). Detection of protein levels was performed by Western blotting and nuclear organization of protein 53BP1 was studied by immunofluorescence. To measure the dynamics of fluorescently labeled proteins in vivo we used FRAP technique, based on analysis of recovery of fluorescence in photobleached region inside the cell nucleus. It was found that the dynamics of mCherry-tagged 53BP1 and GFP-tagged HP1β was different depending on the localization in foci and away from them. When studying the effect of UV radiation on dynamics of GFP-HP1β we registered no differences in comparison with non-irradiated genome. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Eva Bártová |
| Fyzický popis: | 101 listů |