Optimalizace TR-FRET stanovení intracelulárního cAMP v lidských neutrofilech ovlivněných forskolinem a jeho deriváty /

Tato práce se zabývá optimalizací stanovení intracelulárního cyklického AMP (cAMP) metodou TR-FRET v lidských neutrofilech, ve kterých koncentrace cAMP moduluje jejich antimikrobiální procesy zahrnující adhezi, chemotaxi a oxidační vzplanutí. cAMP je v buňkách tvořen z ATP enzymem adenylylcyklázou (...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Hronová, Adéla (Autor práce)
Další autoři: Perečko, Tomáš (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2016
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/409123/prif_b/
Obálka
LEADER 05882ctm a22009137i 4500
001 MUB01006369175
003 CZ BrMU
005 20220217081451.0
008 160618s2016 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2016-10-09 
035 |a (ISMU-VSKP)283433 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035  |e rda 
072 7 |a 577  |x Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 577.113.3  |2 MRF 
100 1 |a Hronová, Adéla  |% UČO 409123  |* [absolvent PřírF MU]  |4 dis 
242 1 0 |a Optimization of TR-FRET measurement of intracellular cAMP in human neutrophils treated with forskolin or its derivatives  |y eng 
245 1 0 |a Optimalizace TR-FRET stanovení intracelulárního cAMP v lidských neutrofilech ovlivněných forskolinem a jeho deriváty /  |c Adéla Hronová 
264 0 |c 2016 
300 |a 43 listů :  |b ilustrace 
336 |a text  |b txt  |2 rdacontent 
337 |a bez média  |b n  |2 rdamedia 
338 |a svazek  |b nc  |2 rdacarrier 
500 |a Vedoucí práce: Tomáš Perečko 
502 |a Bakalářská práce (Bc.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2016 
520 2 |a Tato práce se zabývá optimalizací stanovení intracelulárního cyklického AMP (cAMP) metodou TR-FRET v lidských neutrofilech, ve kterých koncentrace cAMP moduluje jejich antimikrobiální procesy zahrnující adhezi, chemotaxi a oxidační vzplanutí. cAMP je v buňkách tvořen z ATP enzymem adenylylcyklázou (AC) a jedná se o významného sekundárního posla v buněčné signalizaci. Aktivita AC je stimulována forskolinem a jeho deriváty. Metoda TR-FRET je založena na kompetici mezi cAMP značeným chelátem europia a cAMP ve zkoumaném vzorku o vazebné místo na cAMP specifických monoklonálních protilátkách značených Ulight barvivem. V experimentální části byl testován vhodný počet buněk pro měření cAMP, vliv média s Ca2+ a účinnost forskolinu, colforsinu, 7-deacetyl-forskolinu (7DA-FSK) a 1,9-dideoxy-forskolinu (dd-FSK) na stimulaci produkce cAMP. Z výsledků vyplývá, že forskolin a colforsin mají srovnatelný účinek na aktivaci AC neutrofilů, zatímco 7DA-FSK má nižší a dd-FSK téměř žádný účinek na modulaci  |% cze 
520 2 9 |a In this thesis we studied the optimization of the determination of intracellular cyclic AMP (cAMP) by TR-FRET in human neutrophils, in which cAMP levels modulate antimicrobial mechanisms including adhesion, chemotaxis and respiratory burst. cAMP is synthesized from ATP by an enzyme adenylyl cyclase (AC) in the cells and it is one of the most important second messenger in cell signalling. AC activity is stimulated by forskolin and its derivatives. TR-FRET assay is based on the competition between the europium chelate-labeled cAMP tracer and sample cAMP for binding site on cAMP-specific monoclonal antibodies labeled with the Ulight dye. In experimental part we tested optimal cell density for measuring cAMP, influence of medium with Ca2+ and efficacy of forskolin, colforsin, 7-deacetyl-forskolin (7DA-FSK) and 1,9-dideoxy-forskolin (dd-FSK) for stimulation of cAMP production. The results indicate that forskolin and colforsin have a comparable effect on the activation of AC in neutrophils,  |9 eng 
650 0 7 |a adenosin  |7 ph798831  |2 czenas 
650 0 7 |a adenylátcyklasy  |2 czmesh 
650 0 7 |a kolforsin  |2 czmesh 
650 0 7 |a neutrofily  |2 czmesh 
650 0 7 |a rezonanční přenos fluorescenční energie  |2 czmesh 
650 0 9 |a adenosine  |2 eczenas 
650 0 2 |a Adenylyl Cyclases 
650 0 2 |a Colforsin 
650 0 2 |a Fluorescence Resonance Energy Transfer 
650 0 2 |a Neutrophils 
655 7 |a bakalářské práce  |7 fd132403  |2 czenas 
655 9 |a bachelor's theses  |2 eczenas 
658 |a Biochemie  |b Biochemie  |c PřF B-BCH BCHM (BCHM)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Perečko, Tomáš  |7 mub20221141369  |% UČO 233690  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav biochemie  |7 ko2015866760  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/409123/prif_b/ 
CAT |c 20160618  |l MUB01  |h 0421 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20160916  |l MUB01  |h 1322 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20160920  |l MUB01  |h 1222 
CAT |c 20161009  |l MUB01  |h 2232 
CAT |c 20170119  |l MUB01  |h 1537 
CAT |c 20180202  |l MUB01  |h 1042 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1609 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1615 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1623 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 1816 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2021 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2034 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2143 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0148 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0152 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0209 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0735 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0739 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0746 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0749 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1139 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1143 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1156 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1437 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1019 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 2006 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1246 
CAT |a PUTNOVAX  |b 02  |c 20220217  |l MUB01  |h 0814 
CAT |a PUTNOVAX  |b 02  |c 20220217  |l MUB01  |h 0815 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2355 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240605  |l MUB01  |h 0000 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240605  |l MUB01  |h 0003 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2016-10-09 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-K-13315  |5 3285011442  |8 20160916  |f 71  |f Prezenční SKLAD  |r 20160916  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-K-13315  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD