Příprava lektinu PSL2 z hrachu setého (Pisum sativum) /
Tato diplomová práce je zaměřena na optimalizaci produkce a purifikace hypotetického lektinu PSL2 a na jeho následné strukturně - funkční studie. Lektiny jsou proteiny reverzibilně vázající sacharidy. Mimo jiné se vyznačují i tím, že jsou schopny aglutinovat erytrocyty. Vyskytují se napříč živočišno...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Slovenština |
| Vydáno: |
2016
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/393401/prif_m/ |
| Shrnutí: | Tato diplomová práce je zaměřena na optimalizaci produkce a purifikace hypotetického lektinu PSL2 a na jeho následné strukturně - funkční studie. Lektiny jsou proteiny reverzibilně vázající sacharidy. Mimo jiné se vyznačují i tím, že jsou schopny aglutinovat erytrocyty. Vyskytují se napříč živočišnou, rostlinnou, houbovou a bakteriální říší, včetně prvoků. Díky rozsáhlému výskytu a variabilitě funkcí a vlastností mají lektiny široké využití. Na zisk zmíněného proteinu PSL2 byly využity různé kmeny bakteriálních buněk E. coli, které byly transformovány dvěma druhy DNA konstruktů. První konstrukt byl již dříve připraven v naší laboratoři. Obsahoval gen pro fúzní protein tioredoxín, který sloužil nejen jako protein napomáhající rozpustnosti cílového proteinu PSL2, ale zároveň i jako kotva, pomocí které byl tento rekombinantní protein purifikován. Druhý konstrukt byl navržen a připraven v rámci této práce. Obsahoval gen pro vysoce rozpustný NusA fúzní protein, který sloužil na posun produk This thesis is focused on the production optimization and purification of the hypothetical PSL2 lectin and subsequent structural - functional studies. Lectins are proteins reversibly binding carbohydrates. Among other things, they are characterized by the fact that they are able to agglutinate erythrocytes. They are present across animal, plant, fungal and bacterial organisms, including protozoa. Thanks to their major occurence and variability of functions and features, they have wide range of applications. To obtain this PSL2 protein, various strains of E. coli cells were transformed by two kinds of constructs. The first construct was previously prepared in our laboratory. It contained the gene for thioredoxin fusion protein, which is not only conducive to the protein solubility of the target PSL2 protein, but also works as a tag by which the recombinant protein can been purified. A second construct was designed and prepared in this Master´s thesis. It contained the gene for the highl |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Michaela Wimmerová |
| Fyzický popis: | 79 listů, 23 příloh : ilustrace |