Vliv povrchového náboje elicitinů na jejich biologickou aktivitu
Elicitiny jsou rodina malých proteinů se sterol-vazebnou aktivitou sekretovaných oomycetami rodů Phytophthora a Pythium. V několika rostlinách vyvolávají hypersenzitivní odpověď a systémově získanou rezistenci. Na základě jejich pI, které vzájemně souvisí s jejich nekrotickou aktivitou, jsou klasifi...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Angličtina |
| Vydáno: |
2014
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/357298/prif_m/ |
| Shrnutí: | Elicitiny jsou rodina malých proteinů se sterol-vazebnou aktivitou sekretovaných oomycetami rodů Phytophthora a Pythium. V několika rostlinách vyvolávají hypersenzitivní odpověď a systémově získanou rezistenci. Na základě jejich pI, které vzájemně souvisí s jejich nekrotickou aktivitou, jsou klasifikovány na α-elicitiny s 1-3 lyzinovými zbytky nebo vice nekrotizující β- elicitiny s 6-7 lyzinovými zbytky. Tato práce se zabývá vlivem, který mají vybrané lyzinové zbytky a jejich zaměnění s následnou změnou povrchového náboje, na stabilitu proteinu a biologickou aktivitu ve smyslu vyvolávat brzkou obrannou odpověď, jako je produkce reaktivních forem kyslíku a endocytóza. Dvě mutantní formy β-elicitinu kryptogeinu, K48/94T a K61T/N70D/D72E, byly připraveny metodou místně řízené mutageneze a vyprodukovány v expresním systému Pichie pastoris. Výsledky experimentu s dvěma mutantními formami kryptogeinu se zaměněnými lyzinovými zbytky potvrdily vliv povrchového náboje na schopnost přenosu stero Elicitins are a family of small proteins with sterol-binding activity secreted by oomycetes species Phytophthora and Pythium. They are inducing hypersensitive response and systemic acquired resistance in several plants. On the basis of pI, which correlates well with their necrotic ability, they are classified as either α-elicitins with 1-3 lysine residues or more necrotic (50- to 100-fold) more β- elicitins with 6-7 lysine residues. In this study influence of selected lysine residues and consequential change of surface charge on protein stability and biological activity in terms of ability to induce early defence response involving the production of reactive oxygen species and induction of endocytosis was studied. Two mutant forms of β-elicitin cryptogein, K48T/K94T and K61TN70D/D72E, were done by site-directed mutagenesis and expressed in Pichia pastoris expression system. Results of experiments with two mutant forms of cryptogein, with substituted lysine residues, confirmed that elic |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Tomáš Kašparovský |
| Fyzický popis: | 59 l. : il. |