Kvantifikace proteinů pomocí hmotnostní spektrometrie

Dimethylace je účinná metoda relativní kvantifikace hmotnostní spektrometrií, která využívá značení stabilními izotopy. Probíhá jednoduchým mechanismem, kdy reaguje formaldehyd s N-koncem nebo postranním řetězcem lysinu a vzniká Schiffova báze, která je redukována kyanoborohydridem sodným. Kombinací...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Srbová, Eva (Autor práce)
Další autoři: Zdráhal, Zbyněk, 1965- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2013
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/175496/prif_m/
Obálka
LEADER 06789ctm a22011537a 4500
001 MUB01000864503
003 CZ BrMU
005 20231129114438.0
008 130626s2013 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-10-05 
035 |a (ISMU-VSKP)229587 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 543  |x Analytická chemie  |2 Konspekt  |9 10 
080 |a 543.51  |2 MRF 
080 |a 577.112.01:575.111  |2 MRF 
100 1 |a Srbová, Eva  |% UČO 175496  |* [absolvent PřírF MU]  |4 dis 
245 1 0 |a Kvantifikace proteinů pomocí hmotnostní spektrometrie  |h [rukopis] /  |c Eva Srbová 
246 1 1 |a Protein quantification by mass spectrometry 
260 |c 2013 
300 |a 67 l. :  |b il. 
500 |a Vedoucí práce: Zbyněk Zdráhal 
502 |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2013 
520 2 |a Dimethylace je účinná metoda relativní kvantifikace hmotnostní spektrometrií, která využívá značení stabilními izotopy. Probíhá jednoduchým mechanismem, kdy reaguje formaldehyd s N-koncem nebo postranním řetězcem lysinu a vzniká Schiffova báze, která je redukována kyanoborohydridem sodným. Kombinací těchto sloučenin - izotopicky značených a neznačených - lze kvantifikovat až pět vzorků najednou. V této práci byla dimethylace použita ve spojení s metodou přípravy vzorku FASP, která využívá „cut off“ filtry pro separaci proteinů od nízkomolekulárních látek s následným štěpením proteinů trypsinem přímo na filtru. Naštěpené peptidy jednotlivých vzorků jsou následně naznačeny příslušnou značkou, smíchány a kvantifikovány pomocí hmotnostní spektrometrie. Cílem této práce bylo porovnat variabilitu jednotlivých kroků při zpracování vzorku před samotnou hmotnostně spektrometrickou analýzou. Naše výsledky prokázaly, že zásadním zdrojem variability není dimethylace, ale příprava biologických repl  |% cze 
520 2 9 |a Dimethylation is an effective method for relative quantification mass spectrometry, which uses stable-isotope labeling. The mechanism is simple, formaldehyde reacts with the N-terminus or a side chain of lysine to form Schiff base, which is reduced by sodium cyanoborohydride. By combination of these isotopically labeled and non-labeled compounds - up to five samples can be quantified simultaneously. In this work dimethylation was used in conjunction with the method of sample preparation FASP, which uses the "cut off" filters to separate proteins frow low molecular weight compounds and on filter protein digestion with trypsin. The digested peptides of particular samples are labeled by selected tag, samples are pooled and then quantified by mass spectrometry. The aim of this study was to assess variability of sample processing steps prior to the mass spectrometric analysis. Our results have shown that the major source of variability is not dimethylation, but the preparation of biological  |9 eng 
650 0 7 |a hmotnostní spektrometrie s elektrosprejovou ionizací  |2 czmesh 
650 0 7 |a hmotnostní spektrometrie  |7 ph120763  |2 czenas 
650 0 7 |a proteomika  |7 ph347581  |2 czenas 
650 0 7 |a relativní kvantifikace  |2 CZ-BrMU 
650 0 9 |a mass spectroscopy  |2 eczenas 
650 0 9 |a mass spektrometry  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a proteomics  |2 eczenas 
650 0 2 |a Spectrometry, Mass, Electrospray Ionization 
655 7 |a diplomové práce  |7 fd132022  |2 czenas 
658 |a Biochemie  |b Analytická biochemie  |c PřF N-BCH ANBI (ANBI)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Zdráhal, Zbyněk,  |d 1965-  |7 xx0074482  |% UČO 34759  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav biochemie  |7 ko2015866760  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/175496/prif_m/ 
CAT |c 20130626  |l MUB01  |h 0421 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20130930  |l MUB01  |h 1037 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140115  |l MUB01  |h 1257 
CAT |c 20140127  |l MUB01  |h 1924 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140424  |l MUB01  |h 0833 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1641 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1646 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0912 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0924 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0930 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0801 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0804 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140616  |l MUB01  |h 1503 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140829  |l MUB01  |h 1432 
CAT |c 20140911  |l MUB01  |h 1612 
CAT |c 20140912  |l MUB01  |h 1106 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0738 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0806 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0809 
CAT |c 20150703  |l MUB01  |h 1223 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150803  |l MUB01  |h 1743 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1450 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1412 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20151006  |l MUB01  |h 1034 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0409 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0815 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0818 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160906  |l MUB01  |h 1539 
CAT |c 20170119  |l MUB01  |h 1537 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20170814  |l MUB01  |h 1733 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1608 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1614 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1623 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 1816 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2021 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2033 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0147 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0152 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0208 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0735 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0739 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0746 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0749 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1138 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1155 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1436 
CAT |c 20201005  |l MUB01  |h 1143 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1005 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1953 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1222 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20231129  |l MUB01  |h 1144 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2355 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2359 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240605  |l MUB01  |h 0003 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-10-05 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-K-9183  |5 3285005889  |8 20131001  |f 71  |f Prezenční SKLAD  |r 20131001  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-K-9183  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD