Metallochelating nanoliposomes for construction of recombinant vaccines
Liposomy představují nosiče vakcín, které vykazují adjuvantní aktivitu k neseným proteinovým antigenům. Metalochelatační liposomy jsou navrženy pro vazbu His-tagovaných proteinů nekovalentní interakcí. Tyto liposomy byly připraveny ze směsi fosfatidylcholinu a metalochelatačního lipidu DOGS-NTA-Ni m...
Uloženo v:
Hlavní autor: | |
---|---|
Další autoři: | |
Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
Jazyk: | Angličtina |
Vydáno: |
2013
|
Témata: | |
On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/184458/prif_d/ |
Shrnutí: | Liposomy představují nosiče vakcín, které vykazují adjuvantní aktivitu k neseným proteinovým antigenům. Metalochelatační liposomy jsou navrženy pro vazbu His-tagovaných proteinů nekovalentní interakcí. Tyto liposomy byly připraveny ze směsi fosfatidylcholinu a metalochelatačního lipidu DOGS-NTA-Ni metodou odstranění detergentu a metodou hydratace lipidního filmu s následnou extruzí. Jako molekulární adjuvans se do liposomů inkorporovaly nepyrogenní lipofilní deriváty muramyl dipeptidu. Na povrch liposomů byly navázány metalochelatační vazbou His-tagované rekombinantní proteiny GFP, Gp120, OspC a Hsp90. Struktura proteoliposomů byla studována metodami dynamického rozptylu světla, transmisní elektronové mikroskopie, mikroskopie atomárních sil a gelové permeační chromatografie. Liposomy s lipofilními deriváty muramyl dipeptidu orientovanými na povrch liposomu byly rozpoznávány a fagocytovány lidskými dendritickými buňkami v in vitro experimentech. In vivo zmíněná experimentální vakcína ap Liposomes represent nanoscale-based formulations showing a potent adjuvant activity to protein antigens. Metallochelating liposomes were designed to attach His-tagged protein by non-covalent interaction. Metallochelating liposomes were prepared from the mixture of egg phosphatidyl choline and nickel-chelating lipid DOGS-NTA-Ni by the detergent-removal method and by hydration of a lipid film followed by extrusion. New non-pyrogenic hydrophobized derivatives of muramyl dipeptide were incorporated into liposomes as molecular adjuvants. His-tagged recombinant GFP, Gp120, OspC and Hsp90 were attached onto the surface of liposomes by metallochelating bond. The structure of proteoliposomes was studied by dynamic light scattering, transmission electron microscopy, atomic force microscopy, and gel permeation chromatography. The liposomes with surface-exposed hydrophobized derivatives of muramyl dipeptide were well recognized and phagocyted by human dendritic cells in vitro. In vivo, the immune |
---|---|
Popis jednotky: | Vedoucí práce: Jaroslav Turánek |
Fyzický popis: | 144 l. : il. |