The role of myeloperoxidase in the regulation of thrombocyte physiology.
Ačkoli hlavní úloha trombocytů je zabránění krvácení, trombocyty také přispívají k různým procesům, jež mohou probíhat i nad rámec hemostázy a trombózy. Proto změny ve fyziologických funkcích trombocytů mohou vést až k patogenezi cévních zánětlivých procesů. Zánět je spojen s aktivací krevních neutr...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Angličtina |
| Vydáno: |
2012
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/124107/prif_d/ |
| Shrnutí: | Ačkoli hlavní úloha trombocytů je zabránění krvácení, trombocyty také přispívají k různým procesům, jež mohou probíhat i nad rámec hemostázy a trombózy. Proto změny ve fyziologických funkcích trombocytů mohou vést až k patogenezi cévních zánětlivých procesů. Zánět je spojen s aktivací krevních neutrofilních granulocytů a uvolněním myeloperoxidázy (MPO) do krevní cirkulace, což může hrát důležitou úlohu při akutních a chronických onemocnění. Všechny současná data naznačují významnou roli MPO v regulaci cévní a krevní homeostázy. Nicméně účinky MPO na trombocyty jako mechanismus přispívající k cévním zánětlivým onemocněním zůstávají neznámé. V této disertační práci byla zkoumána interakce MPO s trombocyty a její vliv na funkci trombocytů. Využitím kombinací různých metod byla prokázána vazba MPO v závislosti na její koncentraci a to jak na lidské tak myší trombocyty. MPO byla detekována na povrchu i uvnitř trombocytů. Na základě inhibice reorganizace cytoskeletu trombocytů jsme prokázaly, že nebyl nutný žádný aktivní transport pro sekvestraci MPO dovnitř trombocytů. Navíc byla prokázána významnost náboje v interakci MPO s trombocyty. Přítomnost MPO u trombocytů byla v přímém kontrastu s absencí MPO u megakaryocytů, prekurzorů trombocytů izolovaných z myší kostní dřeně. MPO vázaná na trombocytech si udržela její enzymatickou aktivitu. Aktivace trombocytů prostřednictvím MPO byla dokumentována zvýšením exprese povrchových receptorů trombocytů, změnou tvaru zastoupenou zvýšením obsahu F-aktinu a zvýšenou tvorbou reaktivních metabolitů kyslíku. Současně MPO vyvolala u trombocytů sníženou produkci oxidu dusnatého. Nicméně, aktivace byla jen částečná, jelikož MPO nevyvolala agregaci trombocytů. Although the central role of thrombocytes is the prevention of bleeding, they contribute to diverse processes that extend beyond hemostasis and thrombosis. Therefore, alternations in thrombocyte physiological functions can lead to a pathogenesis of vascular inflammatory processes. Inflammation is connected with activation of blood neutrophil granulocytes and with release of myeloperoxidase (MPO) into blood circulation which has been suggested to play important role in acute and chronic vascular diseases. All current data suggest an important role of MPO in regulation of vascular and blood homeostasis. However, MPO effects on thrombocytes as a contributing mechanism to vascular inflammatory diseases remain unknown. In this thesis, the interaction of MPO with thrombocytes and its effects on thrombocyte function were examined. Employing a combination of different methods has shown dose dependent binding of MPO to both human and mouse thrombocytes when MPO was detectable on surface as well as inside the thrombocytes. Based on inhibition of thrombocyte cytoskeleton reorganization, we demonstrated that any active transport for MPO sequestration into thrombocyte would not be required. Moreover, the importance of charge in the interaction of MPO with thrombocytes has been demonstrated. The MPO presence on and in thrombocytes was in direct contrast with absence of MPO in megakaryocytes (MKs), the precursors of thrombocytes isolated from mouse bone marrow (BM). MPO bound to thrombocytes retained its enzymatic activity. An activation of thrombocytes by MPO was documented by MPO mediated increase of an expression of surface thrombocyte receptors, shape change represented by an increased F-actin content and an increased formation of reactive oxygen species (ROS). Simultaneously MPO induced a decrease of nitric oxide production by thrombocytes. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Lukáš Kubala |
| Fyzický popis: | 196 l. |