Možnosti exprese rekombinantních lektinů v eukaryotním systému

Lektiny jsou proteiny neimunitního původu, které rozpoznávají a reverzibilně interagují se sacharidovými strukturami. Hrají důležitou roli v interakcích hostitelské buňky a patogenního organismu. Adhese patogenu na hostitelské tkáně je prvním impulsem k rozvoji bakteriální infekce. Tato práce se zab...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Hýblová, Lenka (Autor práce)
Další autoři: Wimmerová, Michaela, 1968- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Angličtina
Vydáno: 2012
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/269276/prif_m/
Obálka
LEADER 06795ctm a22011657a 4500
001 MUB01000721041
003 CZ BrMU
005 20121123084454.0
008 120626s2012 xr ||||| |||||||||||eng d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-05-07 
035 |a (ISMU-VSKP)210378 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 577  |x Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 577.112  |2 MRF 
080 |a 582.282.23  |2 MRF 
100 1 |a Hýblová, Lenka  |% UČO 269276  |* [absolvent PřírF MU]  |4 dis 
245 1 0 |a Možnosti exprese rekombinantních lektinů v eukaryotním systému  |h [rukopis] /  |c Lenka Hýblová 
246 1 1 |a Lectin Expression Possibilities in Eucaryotic System 
260 |c 2012 
300 |a 73 l. :  |b il. 
500 |a Vedoucí práce: Michaela Wimmerová 
502 |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2012 
520 2 |a Lektiny jsou proteiny neimunitního původu, které rozpoznávají a reverzibilně interagují se sacharidovými strukturami. Hrají důležitou roli v interakcích hostitelské buňky a patogenního organismu. Adhese patogenu na hostitelské tkáně je prvním impulsem k rozvoji bakteriální infekce. Tato práce se zabývá testováním genů čtyř předpokládáných lektinů Aspergillus fumigatus afl1, afl2, afl3 a afl3b. Byla provedena optimalizace PCR těchto genů. Každý gen byl amplifikován ve variantě se STOP kodonem a bez něj - pro připojení polyhistidinové kotvy, která může být využita pro afinitní purifikaci daného rekombinantního proteinu. Bylo provedeno jejich klonování genů do expresního vektoru pPICZα A, který slouží pro expresi rekombinantního proteinu v Pichia pastoris a pYES2/CT, využívaného pro expresi v Saccharomyces cerevisiae. pYES2/CT-afl1 byl elektroporací transformován do Saccharomyces cerevisiae. Následně byly provedeny expresní testy s transformovaným kmenem kvasinek S. cerevisiae INVSc1-pYES  |% cze 
520 2 9 |a Lectins are proteins of non-immune origin, which recognize and reversibly interact with various saccharide structures. The play an important role in host-pathogen interactions. Adhesion of a pathogenic organism to a host tissue is a key impuls for the development of a bacterial infection. This thesis is focusing on testing of genes of four hypothetical lectins of Aspergillus fumigatus afl1, afl2, afl3 and afl3b. PCRs of these genes were optimized. Each gene was amplified in order to receive two constructs - with STOP codon and with the polyhistidine tag, which can be used for eventual affinity purification. The constructs were then cloned into pPICZα A expression vector, exploited for recombinant protein expression in Pichia pastoris and into pYES2/CT, used for expression and secretion of recombinant proteins in Saccharomyces cerevisiae. pYES2/CT-afl1 was electroporated into Saccharomyces cerevisiae. Subsequently, expression tests with transformed strain INVSc1-pYES2/CT-afl1 of Sacchar  |9 eng 
650 0 7 |a Aspergillus fumigatus  |2 czmesh 
650 0 7 |a biopolymery  |7 ph118921  |2 czenas 
650 0 7 |a lektin  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a Saccharomyces cerevisiae  |7 ph280228  |2 czenas 
650 0 9 |a biopolymers  |2 eczenas 
650 0 9 |a lectin  |2 eCZ-BrMU 
650 0 9 |a Saccharomyces cerevisiae  |2 eczenas 
650 0 2 |a Aspergillus fumigatus 
655 7 |a diplomové práce  |7 fd132022  |2 czenas 
658 |a Biochemie  |b Analytická biochemie  |c PřF N-BCH ANBI (ANBI)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Wimmerová, Michaela,  |d 1968-  |7 ola2004235533  |% UČO 854  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav biochemie  |7 ko2015866760  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/269276/prif_m/ 
CAT |c 20120626  |l MUB01  |h 0423 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20120712  |l MUB01  |h 1426 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20121123  |l MUB01  |h 0844 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20130211  |l MUB01  |h 1154 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20130304  |l MUB01  |h 1431 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20130619  |l MUB01  |h 1546 
CAT |c 20140127  |l MUB01  |h 1919 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140424  |l MUB01  |h 0832 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1641 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1646 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0912 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0924 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0930 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0801 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0804 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140804  |l MUB01  |h 1222 
CAT |c 20140911  |l MUB01  |h 1609 
CAT |c 20140912  |l MUB01  |h 1103 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0738 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0805 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0808 
CAT |c 20150703  |l MUB01  |h 1206 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150804  |l MUB01  |h 1736 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1449 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1410 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0244 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160731  |l MUB01  |h 2255 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0814 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0818 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1608 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1614 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1622 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 1815 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2020 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2033 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0147 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0152 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0208 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0734 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0739 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0745 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0749 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1138 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1155 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1436 
CAT |c 20200507  |l MUB01  |h 1113 
CAT |a VACOVAX  |b 02  |c 20201026  |l MUB01  |h 1110 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 0959 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1948 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1214 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20230320  |l MUB01  |h 1550 
CAT |c 20240209  |l MUB01  |h 1157 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2354 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2359 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240605  |l MUB01  |h 0002 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2020-05-07 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-2012-K-8761  |5 3285005283  |8 20121123  |f 70  |f Prezenční  |r 20121123  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-2012-K-8761  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD