Příprava konjugátů kyseliny borité s vybranými enzymy a jejich použití v klinické diagnostice
Hlavního cíle této práce, tedy vytvoření stabilního konjugátu kyseliny 3 (brommethyl) fenylborité (BrPBA) a křenové peroxidázy (HRP) za pomoci můstku z bovinního sérového albuminu (BSA) bylo dosaženo. Lze konstatovat, že výroba takového konjugátu není příliš náročná. Pro ověření konjugace byly použi...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2012
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/211528/prif_m/ |
| Shrnutí: | Hlavního cíle této práce, tedy vytvoření stabilního konjugátu kyseliny 3 (brommethyl) fenylborité (BrPBA) a křenové peroxidázy (HRP) za pomoci můstku z bovinního sérového albuminu (BSA) bylo dosaženo. Lze konstatovat, že výroba takového konjugátu není příliš náročná. Pro ověření konjugace byly použity spektrofotometrické metody a hmotnostní spektroskopie. Průměrný počet molekul kyseliny 3-(brommethyl) fenyl borité navázaných na můstku z bovinního sérového albuminu byl 18. Jako stanovovaný analyt sloužil glykovaný bovinní sérový albumin a průměrný počet navázaných molekul sacharidu bylo také 18. Dalším cílem bylo ověření funkčnosti konjugátu a jeho afinity vůči diolovým strukturám a k tomu byla použita modifikovaná verze metody ELISA a spektrofotometrická metoda s Alizarinem Red S. Tohoto cíle bylo dosaženo pouze částečně. Během ověřování se ukázalo, že konjugát je schopen reagovat nejen pomocí borité skupiny s dioly, ale i dalšími nespecifickými interakcemi. K eliminování těchto nespec The main goal of this thesis the successful conjugation of 3-(bromomethyl) phenylboronic acid and Horse radish peroxidase through linking with bovine serum albumin was achieved. The process of making this conjugate is not too demanding. For the verification of successful conjugation were used spectrofotometric methods and mass spectroscopy. The average number of successfully conjugated molecules of 3-(bromomethyl) phenylboronic acid with bovine serum albumin linker was 18. The glycated bovine serum albumin was prepared as a target for affinity testing. The average number of saccharides molecules on bovine serum albumin was 18. The secondary goal the testing the affinity interaction of this conjugate was achieved only partially. For affinity testing was used modified ELISA method and spectrofotometric method with Alizarin Red S. During the testing had been shown that the interaction between the conjugate and diols was not the only interaction the conjugate is capable of. The elimination |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Jan Přibyl |
| Fyzický popis: | 83 l. : il. |