Klonování a charakterizace glykosyltransferas z lidského patogenu Aspergillus fumigatus

Předložená práce je zaměřena na studium glykosyltransferas, konkrétně na β-1,4-mannosyltransferasu z lidského patogenu A. fumigatus. GTs se významně podílejí na stavbě buněčné stěny patogenních organismů a tím i na jejich virulenci. Proto je získání informací o těchto enzymech velmi důležité. Přípra...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Fleková, Andrea (Autor práce)
Další autoři: Wimmerová, Michaela, 1968- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2011
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/211761/prif_m/
Obálka
LEADER 06917ctm a22011657a 4500
001 MUB01000682442
003 CZ BrMU
005 20111007094544.0
008 110628s2011 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2019-12-20 
035 |a (ISMU-VSKP)189833 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 60  |x Biotechnologie. Genetické inženýrství  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 578/579:616-092  |2 MRF 
080 |a 602.7  |2 MRF 
080 |a 60  |2 MRF 
100 1 |a Fleková, Andrea  |% UČO 211761  |4 dis 
242 1 0 |a Cloning and characterisation of glycosyltransferases from human pathogen Aspergillus fumigatus  |y eng 
245 1 0 |a Klonování a charakterizace glykosyltransferas z lidského patogenu Aspergillus fumigatus  |h [rukopis] /  |c Andrea Fleková 
260 |c 2011 
300 |a 70 l. :  |b il. 
500 |a Vedoucí práce: Michaela Wimmerová 
502 |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2011 
520 2 |a Předložená práce je zaměřena na studium glykosyltransferas, konkrétně na β-1,4-mannosyltransferasu z lidského patogenu A. fumigatus. GTs se významně podílejí na stavbě buněčné stěny patogenních organismů a tím i na jejich virulenci. Proto je získání informací o těchto enzymech velmi důležité. Příprava GTs je velmi obtížná, protože se téměř vždy jedná o transmembránové proteiny, je tedy nutné optimalizovat podmínky pro jejich přípravu. Práce je zaměřena na β-1,4-mannosyltransferasu (Alg1) a její katalytickou doménu. Oba geny byly vklonovány do vektoru pET29b. Celý protein Alg1 se nepodařilo připravit, přestože byly vyzkoušeny různé podmínky optimalizace. Katalytická doména proteinu Alg1 byla po optimalizaci připravena v buněčném kmenu E. coli BL21 (DE3). Téměř všechen cílový protein byl produkován do nerozpustných inkluzních tělísek, proto byla snaha purifikovat katalytickou doménu proteinu Alg1 za denaturačních podmínek. Vyzkoušeny byly také nativní podmínky pro purifikaci, protože  |% cze 
520 2 9 |a The presented thesis is focused on study of glycosyltransferases, specifically on the β-1,4-mannosyltransferase from the human pathogen A. fumigatus. GTs are significantly involved in the synthesis of the cell walls of pathogenic organisms, and thus their virulence. Therefore, knowledge of these enzymes is very important. Preparation of GTs is very difficult, because they are very often transmembrane proteins and it is necessary to optimize conditions for their preparation. The project was focused β-1,4-mannosyltransferase (Alg1) and its catalytic domain. Gene for the enzyme and its shorted part were cloned into the pET29b vector for expression in E. coli host cells. Preparation of the whole protein was not successful, even using different expression strains and conditions. After optimization, the catalytic domain of the protein was produced in the E. coli BL21 (DE3) cells. Unfortunately, the most of the protein was produced in insoluble inclusion bodies, therefore purification of the  |9 eng 
650 0 7 |a Aspergillus fumigatus  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a glykosyltransferasy  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a chelatační chromatografie  |2 CZ-BrMU 
650 0 7 |a klonování  |7 ph121642  |2 czenas 
650 0 7 |a patogenní mikroorganismy  |7 ph115692  |2 czenas 
650 0 7 |a protein mannosyltransferasy  |2 CZ-BrMU 
650 0 9 |a cloning  |2 eczenas 
650 0 9 |a pathogenic microorganisms  |2 eczenas 
655 7 |a diplomové práce  |7 fd132022  |2 czenas 
658 |a Biochemie  |b Biochemie  |c PřF N-BCH BIOCH (BIOCH)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Wimmerová, Michaela,  |d 1968-  |7 ola2004235533  |% UČO 854  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav biochemie  |7 ko2015866760  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/211761/prif_m/ 
CAT |c 20110628  |l MUB01  |h 0423 
CAT |a FOLTYNOVA  |b 02  |c 20111007  |l MUB01  |h 0945 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20111109  |l MUB01  |h 1634 
CAT |a batch  |b 00  |c 20120324  |l MUB01  |h 0149 
CAT |c 20120610  |l MUB01  |h 2027 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20120712  |l MUB01  |h 1426 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20130211  |l MUB01  |h 1154 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20130304  |l MUB01  |h 1248 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20130619  |l MUB01  |h 1546 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140424  |l MUB01  |h 0832 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1641 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140430  |l MUB01  |h 1646 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0912 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0924 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140507  |l MUB01  |h 0930 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0800 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140513  |l MUB01  |h 0804 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140804  |l MUB01  |h 1222 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0737 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140924  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0805 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20141111  |l MUB01  |h 0808 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150804  |l MUB01  |h 1736 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1447 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1408 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0202 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160731  |l MUB01  |h 2255 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0814 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20160802  |l MUB01  |h 0818 
CAT |a CERVINKOVX  |b 02  |c 20170930  |l MUB01  |h 1247 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1608 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1614 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20181107  |l MUB01  |h 1622 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 1815 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2020 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2033 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190105  |l MUB01  |h 2142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0147 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0151 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190126  |l MUB01  |h 0208 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0734 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0739 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0742 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0745 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190307  |l MUB01  |h 0749 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1138 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1142 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1155 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20190521  |l MUB01  |h 1436 
CAT |c 20191220  |l MUB01  |h 1306 
CAT |a VACOVAX  |b 02  |c 20201026  |l MUB01  |h 1110 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 0954 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1943 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1206 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20230320  |l MUB01  |h 1550 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2354 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240604  |l MUB01  |h 2359 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20240605  |l MUB01  |h 0002 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2019-12-20 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-2011-K-8436  |5 3285003922  |8 20111007  |f 70  |f Prezenční  |r 20111007  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-2011-K-8436  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD