Příprava proteinových vzorků z rostlinného materiálu pro LC-MS analýzu

Předložená práce je zaměřena na hodnocení faktorů ovlivňujících kvalitu proteinového vzorku získaného z rostlinného materiálu a optimalizaci postupů přípravy vzorku pro LC-MS/MS analýzu. Jako modelový organismus byla použita rostlina Arabidopsis thaliana. Rostliny, jakožto složitý mnohobuněčný organ...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Stejskal, Karel (Autor práce)
Další autoři: Zdráhal, Zbyněk, 1965- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Čeština
Vydáno: 2010
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/175819/prif_m/
Obálka
LEADER 05604ctm a22009137a 4500
001 MUB01000646092
003 CZ BrMU
005 20201016103902.0
008 100701s2010 xr ||||| |||||||||||cze d
STA |a POSLANO DO SKCR  |b 2019-05-27 
035 |a (ISMU-VSKP)169972 
040 |a BOD114  |b cze  |d BOD035 
072 7 |a 577  |x Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika  |2 Konspekt  |9 2 
080 |a 577.1:581.1  |2 MRF 
080 |a 582.683.2  |2 MRF 
080 |a 577.112.01:575.111  |2 MRF 
080 |a 543.51  |2 MRF 
080 |a (043)378.2  |2 MRF 
080 |a 577  |2 MRF 
100 1 |a Stejskal, Karel  |7 xx0142105  |% UČO 175819  |4 dis 
242 1 0 |a Preparation of plant protein samples for LC-MS/MS analysis  |y eng 
245 1 0 |a Příprava proteinových vzorků z rostlinného materiálu pro LC-MS analýzu  |h [rukopis] /  |c Karel Stejskal 
260 |c 2010 
300 |a 77 l. 
500 |a Vedoucí práce: Zbyněk Zdráhal 
502 |a Diplomová práce (Mgr.)--Masarykova univerzita, Přírodovědecká fakulta, 2010 
520 2 |a Předložená práce je zaměřena na hodnocení faktorů ovlivňujících kvalitu proteinového vzorku získaného z rostlinného materiálu a optimalizaci postupů přípravy vzorku pro LC-MS/MS analýzu. Jako modelový organismus byla použita rostlina Arabidopsis thaliana. Rostliny, jakožto složitý mnohobuněčný organizmus, obsahují mnoho látek proteinové i neproteinové povahy, které mohou negativně ovlivnit výsledek přípravy proteinového vzorku, jeho analýzy a následně i výsledky celého experimentu. V práci byly srovnány vybrané postupy izolace proteinů z rostliny. Následně byly optimaliozovány tři varianty postupů přípravy proteinového peletu v kombinaci s LC-MS/MS analýzou. Kombinací všech tří postupů bylo identifikováno 524 proteinů. Na základě znalosti pI identifikovaných proteinů bylo zjištěno, že 12 % proteinů (pI > 10) by nebylo možné separovat a následně identifikovat ve vzorku pomocí klasické dvou-rozměrné gelové elektroforézy.  |% cze 
520 2 9 |a The diploma thesis is focused on evaluation of factors influencing quality of protein sample isolated from plants and optimalization of sample preparation protocols prior LC-MS/MS analysis. Arabidopsis thaliana was employed as a model. Generally, plants contains plenty of protein and non-protein components, which could complicate preparation of protein isolate and have a negative influence on analysis and final results of the whole experiment. Here, selected isolation procedures were compared. Subsequently, three sample preparation protocols combined with LC-MS/MS analysis were optimalized. Total number of 524 proteins was identified by combination of all three tested sample preparation procedures employing LC-MS/MS analysis in TCA/acetone isolates. Based on pI knowledge of identified proteins we can conclude that about 12 % of proteins (pI > 10) could not be separated and subsequently detected by classical two-dimensional gel electrophoresis.  |9 eng 
650 0 7 |a biochemie rostlin  |7 ph333390  |2 czenas 
650 0 7 |a hmotnostní spektrometrie  |7 ph120763  |2 czenas 
650 0 7 |a huseníček rolní  |7 ph116928  |2 czenas 
650 0 7 |a proteomika  |7 ph347581  |2 czenas 
650 0 9 |a Arabidopsis thaliana  |2 eczenas 
650 0 9 |a mass spectrometry  |2 eczenas 
650 0 9 |a mass spectroscopy  |2 eczenas 
650 0 9 |a plant biochemistry  |2 eczenas 
650 0 9 |a proteomics  |2 eczenas 
655 7 |a diplomové práce  |7 fd132022  |2 czenas 
655 9 |a master's theses  |2 eczenas 
658 |a Biochemie  |b Analytická biochemie  |c PřF N-BCH ANBI (ANBI)  |2 CZ-BrMU 
700 1 |a Zdráhal, Zbyněk,  |d 1965-  |7 xx0074482  |% UČO 34759  |4 ths 
710 2 |a Masarykova univerzita.  |b Ústav experimentální biologie  |7 mzk2008412438  |4 dgg 
856 4 1 |u http://is.muni.cz/th/175819/prif_m/ 
CAT |c 20100702  |l MUB01  |h 1037 
CAT |a VARTECKA  |b 02  |c 20100930  |l MUB01  |h 0936 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20110119  |l MUB01  |h 1134 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20110119  |l MUB01  |h 1139 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20110119  |l MUB01  |h 1143 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20110120  |l MUB01  |h 1005 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20110120  |l MUB01  |h 1007 
CAT |c 20110627  |l MUB01  |h 1918 
CAT |c 20110627  |l MUB01  |h 2328 
CAT |a batch  |b 00  |c 20120324  |l MUB01  |h 0139 
CAT |c 20120610  |l MUB01  |h 2009 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20120919  |l MUB01  |h 0930 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20130304  |l MUB01  |h 1109 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140115  |l MUB01  |h 1257 
CAT |c 20140127  |l MUB01  |h 1905 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140514  |l MUB01  |h 0902 
CAT |a POSPEL  |b 02  |c 20140514  |l MUB01  |h 1228 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140616  |l MUB01  |h 1503 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20140829  |l MUB01  |h 1432 
CAT |c 20150703  |l MUB01  |h 1127 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20150803  |l MUB01  |h 1743 
CAT |c 20150901  |l MUB01  |h 1445 
CAT |c 20150921  |l MUB01  |h 1406 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20151006  |l MUB01  |h 1034 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20151226  |l MUB01  |h 0116 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20160906  |l MUB01  |h 1539 
CAT |a HANAV  |b 02  |c 20170814  |l MUB01  |h 1733 
CAT |c 20190527  |l MUB01  |h 1024 
CAT |a PTICHAX  |b 02  |c 20201016  |l MUB01  |h 1039 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 0947 
CAT |c 20210614  |l MUB01  |h 1937 
CAT |a BATCH  |b 00  |c 20210724  |l MUB01  |h 1158 
LOW |a POSLANO DO SKCR  |b 2019-05-27 
994 - 1 |l MUB01  |l MUB01  |m VYSPR  |1 KUK  |a Knihovna univ. kampusu  |2 SKLAD  |b KUK - sklad  |3 PřF-2010-K-7799  |5 3285003265  |8 20100930  |f 71  |f Prezenční SKLAD  |r 20100930  |s převod 
AVA |a MED50  |b KUK  |c KUK - sklad  |d PřF-2010-K-7799  |e available  |t K dispozici  |f 1  |g 0  |h N  |i 0  |j SKLAD