Analýza dynamiky telomer in vivo
Náplní této diplomové práce byla analýza dynamiky telomer a telomerových asociací in vivo pomocí fluorescenční mikroskopie živých buněk. Byly zavedeny a rutinně odzkoušeny stabilní a přechodné transfekce buněk a jako modelový materiál bylo použito osm buněčných linií, které se lišily mj. způsobem ud...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2007
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/63981/prif_m/ |
| Shrnutí: | Náplní této diplomové práce byla analýza dynamiky telomer a telomerových asociací in vivo pomocí fluorescenční mikroskopie živých buněk. Byly zavedeny a rutinně odzkoušeny stabilní a přechodné transfekce buněk a jako modelový materiál bylo použito osm buněčných linií, které se lišily mj. způsobem udržování telomer. Do buněk byly stabilně nebo přechodně vneseny expresní vektory pro fluorescenčně značené telomer-vazebné proteiny TRF1 a TRF2. Za účelem podrobných analýz dynamiky telomer a telomerových asociací byly vybrány tyto dvě nejvhodnější kombinace buněčné linie, vektoru a typu transfekce: a) buněčná linie U-2 OS transfekovaná stabilně vektorem pro telomer-vazebný protein TRF1 značený GFP a b) buněčná linie SK-LU-1 transfekovaná přechodně vektorem pro telomer-vazebný protein TRF2 značený EYFP. Vizualizované telomery byly detailně studovány pomocí vysokorozlišovací fluorescenční mikroskopie živých buněk v čase a získaná obrazová data byla analyzována ve 2D i 3D prostoru pomocí modulů. The main goal of this diploma thesis was the analysis of dynamics of telomeres and their associations in vivo using fluorescent microscopy of living cells. We introduced and routinely conducted stable and transient transfections of cells and as a model material we used eight cell lines that differed in the mechanism of telomere maintenance. Expression vectors for fluorescently labeled telomere-binding proteins TRF1 and TRF2 were stably or transiently transfected into the cells. To analyze the dynamics of telomeres and their associations we selected two best combinations of cell lines, vectors and transfection types: a) cell line U-2 OS stably transfected with vector for telomere-binding protein TRF1 labeled with GFP and b) cell line SK-LU-1 transiently transfected with vector for telomere-binding protein TRF2 labeled with EYFP. Visualized telomeres were analyzed in great detail using time-lapse high-resolution fluorescent microscopy of living cells and obtained image data were analyzed. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Jana Amrichová |
| Fyzický popis: | 57 l. |