Moderní trendy v detekci apoptózy a autofágie u vybraných solidních nádorů /
Buněčná smrt hraje klíčovou roli nejen v mnoha fyziologických procesech, ale také téměř u všech lidských onemocnění. Její pochopení je podmíněno správnými metodickými přístupy v její analýze a hodnocení. V této práci byla sumarizována současná klasifikace jednotlivých typů buněčných smrtí a zhodnoce...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2017
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/141792/lf_d/ |
| Shrnutí: | Buněčná smrt hraje klíčovou roli nejen v mnoha fyziologických procesech, ale také téměř u všech lidských onemocnění. Její pochopení je podmíněno správnými metodickými přístupy v její analýze a hodnocení. V této práci byla sumarizována současná klasifikace jednotlivých typů buněčných smrtí a zhodnoceny metody jejich detekce. Na základě těchto poznatků je předložena nová metoda hodnocení buněčné viability spojená s detekcí morfologických procesů typických pro základní typy buněčné smrti (apoptóza a nekróza). Na buněčných liniích odvozených od solidních nádorů byla pomocí různých mikroskopických metod v průběhu času sledována buněčná morfologie. Klíčovou roli zde hrálo kvantitativní fázové zobrazování (QPI), které se zapojením moderních metod analýzy obrazu umožňuje citlivou kvantifikaci morfologických změn buňky. Tyto analýzy byly doplněny průtokovou cytometrií, konvenčními testy viability, sledováním hladin exprese na úrovni mRNA a proteinů. Cell death plays a crucial role not only in physiological processes but also in almost all human diseases. Proper understanding is conditioned by appropriate methodical approaches in cell death analysis and assessment. This work summarizes recent classification of individual type of cell death modalities and provides the summary of methodological approaches for their detec-tion. On the basis of these findings, a new method for cell viability assessment is presented, enabling distinction of typical morphological parameters of apoptosis and necrosis. Experiments were performed in vitro on cell lines. MTT test and the analysis of cancer cell growth in the real-time were used to analyze the cytotoxic effect of antineoplastic drug. Gene and protein expression was analyzed by real-time PCR and by immunoassays. Morpho-logical parameters of cells were obtained using various microscopic techniques and flow-cytometry. QPI played the key role in these analyses. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Michal Masařík |
| Fyzický popis: | 102 listů |