Structural characterization of the human regulatory domain of tyrosine hydroxylase by NMR spectroscopy/
Tyrosinhydroxylasa je enzym, který katalyzuje hydroxylaci tyrosinu na L-3,4-dihydroxyfenylalanin (L-DOPA). Tato reakce je prvním a zároveň rychlost určujícím krokem z kaskády přeměn, vedoucích k důležitým neurotransmiterům - dopaminu, noradrenalinu a adrenalinu. Aktivita tohoto enzymu je modulována...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Angličtina |
| Vydáno: |
2016
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/393339/prif_m/ |
| Shrnutí: | Tyrosinhydroxylasa je enzym, který katalyzuje hydroxylaci tyrosinu na L-3,4-dihydroxyfenylalanin (L-DOPA). Tato reakce je prvním a zároveň rychlost určujícím krokem z kaskády přeměn, vedoucích k důležitým neurotransmiterům - dopaminu, noradrenalinu a adrenalinu. Aktivita tohoto enzymu je modulována fosforylací regulační domény a interakcí s proteiny rodiny 14-3-3. V této diplomové práci se věnujeme charakterizaci regulační domény proteinu tyrosinhydroxylasy z hlediska spektroskopie nukleární magnetické rezonance (NMR). Hlavní výzvu při tomto procesu představuje dimerizace této domény a vnitřně neuspořádaný charakter přibližně 70 aminokyselin z jejího N-konce, zatímco zbylých přibližně 100 residuí je dobře uspořádaných. Prvním krokem při NMR studiu proteinu bylo přiřazení chemických posunů jednotlivým atomům. Pomocí neuniformně vzorkovaných spekter o vysoké dimenzionalitě (5D) bylo možné přiřadit téměř kompletní neuspořádanou oblast. Pro přiřazení strukturované oblasti jsme vyvinuli ... Tyrosine hydroxylase is an enzyme catalysing the hydroxylation tyrosine to L-3,4-dihydroxyfenylalanine (L-DOPA). This reaction is the first and rate-limiting step in a biochemical pathway leading to important neurotransmitters - dopamine, noradrenaline and adrenaline. The activity of this enzyme is modulated by phosphorylation of its regulatory domain and by interaction with proteins of 14-3-3 family. In this diploma thesis we study the regulatory domain of tyrosine hydroxylase using nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). The main challenges arise from the dimeric nature of the regulatory domain, which contains both intrinsically disordered N-terminal (about 70 residues) and ordered (about 100 residues) region. The first step of NMR protein characterization is the assignment of chemical shifts for individual atoms. We managed to assign the disordered part almost completely using high-dimensional non-uniformly sampled spectra. For the assignment of structured part we ... |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Jozef Hritz |
| Fyzický popis: | xix, 62 stran |