Studium sarkosinu a jeho metabolismu u nádorových onemocnění
Hlavním cílem této práce byla detailní studie metabolismu sarkosinu a s ním souvisejících látek. Bylo provedeno několik analýz. Množství jednotlivých aminokyselin u prostatických buněčných linií PNT1A, 22RV1 a PC3 bylo měřeno pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Porovnání těchto metabolick...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2015
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/324455/prif_m/ |
| Shrnutí: | Hlavním cílem této práce byla detailní studie metabolismu sarkosinu a s ním souvisejících látek. Bylo provedeno několik analýz. Množství jednotlivých aminokyselin u prostatických buněčných linií PNT1A, 22RV1 a PC3 bylo měřeno pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Porovnání těchto metabolických profilů u nádorových a nenádorových buněčných linií poskytlo pohled na možnost alterací spojených s metabolismem sarkosinu a jeho zvýšených hladin u pacientů s rakovinou prostaty. Další metodou pro výzkum sarkosinu a jeho metabolitů bylo monitorování proliferace v reálném čase (xCELLigence) v závislosti na koncentraci testovaných látek glycinu, sarkosinu a dimethylglycinu. Elektroforéza, imunodetekce a qRT-PCR s využitím TaqMan sond byly použity pro sledování exprese na úrovni RNA a proteinu nejdůležitějšího enzymu metabolismu sarkosinu glycin N-methyltransferázy. Aminokyselinový profil buněčných linií PNT1A, 22RV1 a PC3 odhalil zvýšenou koncentraci sarkosinu a serinu u nádorových buněčn The aim of this thesis was a detailed study of sarcosine and its metabolism. Several analyzes were performed. The concentration of each amino acid in prostate cell lines PNT1A, 22RV1 and PC3 was measured by high performance liquid chromatography. A comparison of the metabolic profiles in tumor and non-tumor cell lines provides an overall insight tothe possible alterations associated with the metabolism of sarcosine and its elevated levels in patients with prostate cancer. Another method for sarcosine research was monitoring of proliferation in real time (xCELLigence system). Cell lines were cultured in medium with added glycine, sarcosine, and dimethylglycine. Electrophoresis, immunodetection and qRT-PCR were used to monitor the expression of glycine N-methyltransferase at the RNA and protein level. The amino acid profile of cell lines PNT1A, 22RV1 and PC3 revealed increased concentration of sarcosine and serine in tumor cell lines 22RV1 and PC3 as well as the change of sarcosine conce |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Michal Masařík |
| Fyzický popis: | 82 listů |