Studium vlivu ethylenového receptoru ETR1 na cytokininovou signální dráhu u rostlin.
V teoretické části bakalářské práce jsou shrnuty dosavadní poznatky o dvoukomponentním a vícestupňovém přenosu signálu u prokaryot a eukaryot. Je popsán mechanismus cytokininové a ethylenové signální dráhy u Arabidopsis thaliana, ethylenový receptor ETR1 a jeho interakce s fosfotransferovými protein...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2012
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/323905/prif_b/ |
| Shrnutí: | V teoretické části bakalářské práce jsou shrnuty dosavadní poznatky o dvoukomponentním a vícestupňovém přenosu signálu u prokaryot a eukaryot. Je popsán mechanismus cytokininové a ethylenové signální dráhy u Arabidopsis thaliana, ethylenový receptor ETR1 a jeho interakce s fosfotransferovými proteiny AHP1-AHP3. Experimentální část bakalářské práce byla zaměřena na získání proteinu přijímačové domény ethylenového receptoru ETR1 (ETR1RD) z Arabidopsis thaliana. Gen ETR1RD byl naklonován do expresních vektorů pETM60-Ub2 a pETM60-Ub3, čímž vznikly konstrukty kódující fúzní proteiny Ub2-His6-ETR1RD a Ub3-His6-ETR1RD. Fúzní proteiny byly exprimovány v bakteriálním systému E. coli. Nativní protein ETR1RD byl získán metalochelatační afinitní purifikací fúzního proteinu Ub3-His6-ETR1RD a jeho štěpením S-TEV proteázou. Nativní protein ETR1RD byl však získán v nehomogenní formě a také MS analýza intaktní molekulové hmotnosti ukázala o něco vyšší molekulovou hmotnost než je teoretická. The theoretical part of the bachelor thesis reviews the current knowledge regarding the signal transduction via two-component system and multi-step phosphorelay in prokaryotes and eukaryotes. The mechanism of cytokinin and ethylene signalling pathways in Arabidopsis thaliana, ethylene receptor ETR1 and its interactions with phosphotransfer proteins AHP1-AHP3 are described. The experimental part of the thesis was aimed at obtaining a protein of the receiver domain of the ethylene receptor ETR1 (ETR1RD) from Arabidopsis thaliana. The gene ETR1RD was cloned into expression vectors pETM60-UB2 and pETM60-Ub3, creating constructs encoding the fusion proteins Ub2-His6-ETR1RD or Ub3-His6-ETR1RD. Fusion proteins were expressed in E. coli bacterial system. Native protein ETR1RD was obtained by S-TEV protease cleavage of the purified fusion protein Ub3-His6-ETR1RD. Obtained pure native protein ETR1RD wasn´t homogeneous, and MS analysis of intact molecular weight showed slightly higher molecular w |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Blanka Pekárová |
| Fyzický popis: | 50 l. : il. |