Proteomika u mnohočetného myelomu
Hlavním cílem disertační práce bylo zavedení metodických přístupů k proteomické analýze plazmatických buněk a krevní plazmy pacientů nemocných mnohočetným myelomem se zaměřením na dvourozměrnou gelovou elektroforézu a identifikaci proteinů hmotnostní spektrometrií. Do rutinního provozu byl zaveden s...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2011
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/12861/lf_d/ |
| Shrnutí: | Hlavním cílem disertační práce bylo zavedení metodických přístupů k proteomické analýze plazmatických buněk a krevní plazmy pacientů nemocných mnohočetným myelomem se zaměřením na dvourozměrnou gelovou elektroforézu a identifikaci proteinů hmotnostní spektrometrií. Do rutinního provozu byl zaveden separační algoritmus plazmatických buněk ze vzorků kostní dřeně s různou vstupní infiltrací nádorovými plazmatickými buňkami. Jako rozhodovací kritérium pro použití magnetické a fluorescenční separace byla zvolena hodnota procentuálního zastoupení PB v mononukleární frakci pro zisk populace PB o čistotě minimálně 70 %. V první části experimentální práce byla provedena optimalizace solubilizace proteinů v modelovém systému nádorové buněčné linie a separovaných buněk získaných od nemocných MM. Standardní 2-DE metodika byla použita k měření rozdílových proteinových změn buněk linie ARH-77 ovlivněné přídavkem bortezomibu. Dále byla provedena pilotní srovnávací 2-DE analýza proteomu separovaných P The main aim of this PhD thesis was establishment of methods for proteomic analysis of plasma cells and blood plasma of multiple myeloma patients aimed at two-dimensional gel electrophoresis and identification by mass spectrometry. Separation algorithm of plasma cells from bone marrow with various entry infiltrations of malignant plasma cells was introduced intro routine operation. As the criteria used for magnetic and fluorescence separation, PC infiltration in mononuclear fraction to ensure gain of PC population of purity at least 70% was chosen.In the first part of the experimental work was carried out the optimization of protein solubility in the model system of tumor cell lines and separated cells of MM patients. Standard 2-DE method was used to measure differences in proteins in the ARH-77 cell line after bortezomib treatment. A pilot comparative 2-DE analysis of proteome of separated PC was performed. The main outcome of this work was identification and characterization of three |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Roman Hájek |
| Fyzický popis: | 130 s. |