Studium metabolismu léčiv cytochromy P450 pomocí kapilární elektroforézy
Kapilární elektroforéza je respektovaná analytická technika, která kromě všestranné použitelnosti a jednoduchosti nabízí v principu nenáročné vedení chemických nebo biochemických reakcí v nanolitrových objemech. Metodika, která způsoby takto vedených reakcí popisuje, se nazývá elektroforeticky zpros...
Uloženo v:
Hlavní autor: | |
---|---|
Další autoři: | |
Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
Jazyk: | Čeština |
Vydáno: |
2010
|
Témata: | |
On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/175764/prif_m/ |
Shrnutí: | Kapilární elektroforéza je respektovaná analytická technika, která kromě všestranné použitelnosti a jednoduchosti nabízí v principu nenáročné vedení chemických nebo biochemických reakcí v nanolitrových objemech. Metodika, která způsoby takto vedených reakcí popisuje, se nazývá elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza (EMMA). Tato práce se zabývá vývojem metody EMMA pro stanovení kinetických parametrů reakce CYP2C9 s diklofenakem. Kromě optimalizace separačních podmínek pro stanovení produktu reakce, je popsán i matematický náhled na míchání zón v rámci EMMA formou tzv. predikce EMMA. Dále jsou uvedena stanovení parametrů predikce EMMA, jako jsou délka nadávkované zóny a mobility jednotlivých reaktantů. Byly vyvíjeny dvě varianty EMMA, které se ale nepodařilo optimalizovat. Příčinou byla pozorovaná inaktivace CYP2C9 při inkubaci v kapiláře. Předpokládaným mechanismem inaktivace je absorpce CYP2C9 na stěnu kapiláry. Capillary electrophoresis is well respected analytical technique. It offers except versatility and simplicity in principle easily executable chemical or biochemical reaction in nano-litre scale. Methodology which describes mentioned is called electrophoretically mediated microanalysis (EMMA). This thesis is focused on EMMA method development for determination of kinetic constants of CYP2C9 reaction with diclofenac. Expect optimization of separation conditions for quantification of reaction product, there is a part of this work which deals with mathematical insight on mixing zone in terms of EMMA, called EMMA prediction. This part is followed by determination of EMMA prediction parameters, such as length of injected zone and reactant mobilities. There were developed two different EMMA variants; both were unsuccessfully due to the observation of CYP2C9 inactivity in “in-capillary” driven reactions. |
---|---|
Popis jednotky: | Vedoucí práce: Zdeněk Glatz |
Fyzický popis: | 59 l. |