Microfluidics for the analysis of biologically important substances
Tato dizertační práce se zabývá on-line spojením separačních technik, především isoelektrické fokusace a izotachoforézy s hmotnostním spektrometrem s ionizací elektrosprejem. Zařízení MicroRotoforTM bylo využito pro isoelektrickou fokusaci tryptických digestů cytochromu C, myoglobinu, hovězího sérov...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Angličtina |
| Vydáno: |
2009.
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/53349/prif_d/ |
| Shrnutí: | Tato dizertační práce se zabývá on-line spojením separačních technik, především isoelektrické fokusace a izotachoforézy s hmotnostním spektrometrem s ionizací elektrosprejem. Zařízení MicroRotoforTM bylo využito pro isoelektrickou fokusaci tryptických digestů cytochromu C, myoglobinu, hovězího sérového albuminu a β-caseinu. Hlavní část zařízení byla tvořena fokusační celou o celkovém objemu 2,5 ml, mechanicky rozdělenou polyesterovými membránami do deseti oddělení. Fokusace byla prováděna ve dvou základních módech - jako autofokusace bez použití amfolytů, nebo s pH gradientem tvořeným pomocí komerčních amfolytů. Systém sloužil pro zjednoduššení vzorku před další analýzou zónovou elektroforézou a identifikací na hmotnostním spektrometru s ionizací elektrosprejem. Měření na hmotnostním spektrometru ukázalo značné potlačení signálu analytu v důsledku použití komerčních amfolytů a autofokusační mód vykázal vyšší potenciál pro identifikaci peptidů. This work is focused on on-line coupling of separation techniques, especially isoelectric focusing and isotachophoresis with electrospray mass spectrometry A multicompartment electrolyzer MicroRotoforTM was used for isoelectric focusing of tryptic digests of cytochrome C, myoglobin, bovine serum albumin and β-casein. The main part of MicroRotoforTM device was formed by focusing cell with total volume 2.5 ml divided into ten compartments by permeable polyester screens. Focusing process was performed either in autofocusing mode or with pH gradient formed by carrier ampholytes. The system served for sample simplification before zone electrophoresis and electrospray mass spectrometry identification. Mass spectrometry analysis showed high ion suppression in case of carrier ampholytes and autofocusing mode showed higher sequence coverage in peptide identification. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: František Foret. |
| Fyzický popis: | 88 l. + 1 sv. (29 s.) |