Fermentative production of recombinant haloalkane dehalogenases

Tato studie se zaměřuje na fermentativní produkci halogenalkandehalogenáz (HLDs), bakteriálních enzymů hydrolyticky štěpících vazbu uhlík-halogen v alifatických uhlovodících. Fermentativní produkce byla zavedena pro tyto tři enzymy: LinBwt, DhaA31 a DatAwt. Ve srovnání s kultivacemi ve třepané láhvi...

Celý popis

Uloženo v:
Podrobná bibliografie
Hlavní autor: Polínek, Jiří (Autor práce)
Další autoři: Damborský, Jiří, 1969- (Vedoucí práce)
Typ dokumentu: VŠ práce nebo rukopis
Jazyk:Angličtina
Vydáno: 2009
Témata:
On-line přístup:http://is.muni.cz/th/151068/prif_m/
Obálka
Popis
Shrnutí:Tato studie se zaměřuje na fermentativní produkci halogenalkandehalogenáz (HLDs), bakteriálních enzymů hydrolyticky štěpících vazbu uhlík-halogen v alifatických uhlovodících. Fermentativní produkce byla zavedena pro tyto tři enzymy: LinBwt, DhaA31 a DatAwt. Ve srovnání s kultivacemi ve třepané láhvi byly výtěžky proteinů z fermentací srovnatelné (LinBwt a DhaA31) nebo vyšší (DatAwt). Byly identifikovány dva důležité faktory ovlivňující produkci biomasy a výtěžek proteinu: (i) složení a (ii) růstová podpora kultivačního media. Studie ukázala vliv nutriční hodnoty kvasničního extraktu a obsahu glukózy v kultivačním mediu na efektivitu kultivace. Fermentativní produkce HLDs a její scale-up je nezbytným krokem pro použití HLDs v bioremediacích polutantů životního prostředí, v syntéze čistých chemických látek, konstrukci biosenzorů, dekontaminaci bojových látek a buněčných zobrazovacích technologiích.
This study focuses on a fermentative production of haloalkane dehalogenases (HLDs), bacterial enzymes with ability to hydrolytically cleave carbon-halogen bond in aliphatic hydrocarbons. Fermentative production of three HLDs, LinBwt, DhaA31 and DatAwt, was established. The protein yields were comparable (LinBwt and DhaA31) or higher (DatAwt) with the yields from the shake flask cultivations. Two important factors affecting formation of biomass and protein yield were identified and investigated: (i) composition and (ii) growth supporting ability of a cultivation medium. The investigations revealed that nutritional value of yeast extract and glucose content in the cultivation medium has significant impact on effectiveness of the cultivations. Scaled-up fermentative production of HLDs is essential step for their use in bioremediation of environmental pollutants, synthesis of fine chemicals, construction of biosensors, decontamination of warfare agents and cell imaging.
Popis jednotky:Vedoucí práce: Jiří Damborský
Fyzický popis:63 l.