Testování rezistence B-CLL buněk s mutantní a wild-type konformací proteinu p53 na chemoterapii a jejich senzitivizace monoklonální protilátkou rituximab
Aberace dvou kooperujících genů, p53 a ATM, významně zhoršují prognózu a možnosti léčby u B-CLL pacientů. Monoklonální protilátka rituximab (anti CD20) je u B-CLL více využívána v kombinovaných terapeutických režimech, často obsahujících fludarabin. Existuje velmi málo in vitro dat, která ukazují ef...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2007
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/85269/prif_m/ |
| Shrnutí: | Aberace dvou kooperujících genů, p53 a ATM, významně zhoršují prognózu a možnosti léčby u B-CLL pacientů. Monoklonální protilátka rituximab (anti CD20) je u B-CLL více využívána v kombinovaných terapeutických režimech, často obsahujících fludarabin. Existuje velmi málo in vitro dat, která ukazují efekt tohoto obvyklého treatmentu B-CLL buněk s aberantním p53 a/nebo ATM. Data, která by ukazovala efekt kombinace rituximabu a chlorambucilu, také chybí. Cílem práce bylo určit in vitro efekt výše zmiňovaných kombinací látek na B-CLL buňky s různým p53/ATM statutem. Pro určení delecí p53 a ATM byla použita metoda I-FISH. Jako doplněk screeningu p53 pro určení mutací p53 byla použita funkční analýza FASAY spojená se sekvenováním. Pro monitorování efektu použitých látek na buněčnou viabilitu byl použit WST-1 assay. Byl použit in vitro systém neobsahující aktivní lidskou plazmu, takže byl vyloučena lýze komplementem jako mechanismus učinku rituximabu. Po předošetření buněk rituximabem (10 ug.ml. Aberrations of two co-operating genes, the p53 and ATM, significantly deteriorate prognosis and treatment options for B-CLL patients. Monoclonal antibody rituximab (anti-CD20) is preferably used in combination regimens in B-CLL, often in those containing fludarabine. Very few in vitro data exist, however, showing an effect of such common treatment on B-CLL cells with aberrant p53 and/or ATM. In this respect, the data are also missing for a potential application of rituximab with chlorambucil. The aims were to assess the in vitro effect of the above mentioned combinations of drugs on B-CLL cells with various p53/ATM status. An interphase FISH was used for a determination of p53 and ATM deletions. Functional FASAY analysis coupled to sequencing was employed to supplement the screening also for p53 mutations. A metabolic WST-1 assay monitored the drugs effect on cell viability. An in vitro system lacking active human plasma was used, thus omitting the CDC pathway. After rituximab pre-trea. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Martin Trbušek |
| Fyzický popis: | 66 l., [4] l. příl. : il. |
| Bibliografie: | Bibliografie na l. 55-64. |