Použití elektromigračních separačních technik a hmotnostní spektrometrie (MALDI) při studiu vlastností mikroorganismů v různých vývojových stadiích
Byl syntetizován neionogenní tenzid polyethyelnhlykol 4-(1-pyren)butanoat, který byl použit pro CIEF sfluorimetrickou detekcí. Toto barvivo bylo užito jako aditivum elektrolytů vkapilární izoelektrické fokusaci pro dynamickou modifikaci vzorku proteinů a mikroorganizmů. Hodnota izoelektrického bodu...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2006
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/64091/prif_m/ |
| Shrnutí: | Byl syntetizován neionogenní tenzid polyethyelnhlykol 4-(1-pyren)butanoat, který byl použit pro CIEF sfluorimetrickou detekcí. Toto barvivo bylo užito jako aditivum elektrolytů vkapilární izoelektrické fokusaci pro dynamickou modifikaci vzorku proteinů a mikroorganizmů. Hodnota izoelektrického bodu značených bioanalytů byla, spočítána užitím fluorescenčních pI markerů a porovnána shodnotami natviních látek. Směsi mikroorganizmů a proteinů , Escherichia coli CCM 3954, Staphylococcus epidermidis CCM 4418, Stenotrophomonas maltophilia, Candida albicans CCM 8180, Candida parapsilosis, Candida glabrata, byly reprodukovatelně fokusovány a separovány danými technikami. Pro fluorometrické detekce on columm, bylo minimální detekované množství vna úrovni jednotlivých buněk, injektovaných do separační kapiláry. Tvorba biofirmu je důležitý faktor virulence, indikují vyšší klinický význam S. epidermidis kmenů izolovaných zklinického materiálu. The non-ionogenic pyrene based tenside, poly(ethylene glycol) pyrenebutanoate, was prepared and applied in CIEF with fluorometric detection in gradient of pH range 2-5 end 1-10. This dye was used as a buffer additive in capillary isoelectric focusing for a dynamic modification of the sample of proteins and microorganisms. The values of the isoelectric points of the labeled bioanalytes were calculated with use of the fluorescent pI markers and were found comparable with pI of the native compounds. The mixed cultures of proteins and microorganisms, Escherichia coli CCM 3954, Staphylococcus epidermidis CCM 4418, Stenotrophomonas maltophilia, Candida albicans CCM 8180, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Candida were reproducibly focused and separated by the suggested technique. Using UV excitation for the on column fluorometric detection, the minimum detectable amount was down to single cells injected on the separation capillary. |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Marie Horká |
| Fyzický popis: | 62 l. |