Exprese izoforem těžkého řetězce myozinu v srdci a jejich elektroforetická separace
V srdci savců jsou exprimovány dvě izoformy těžkého řetězce myozinu - alfa (MHC alfa) a beta (MHC-beta). Jejich poměrná exprese koreluje s frekvencí kontrakce srdce. MHC-alfa je označován jako rychlý myozin s vyšší ATPázovou aktivitou, MHC-beta je označován jako pomalý myozin. Během vývoje a při něk...
Uloženo v:
| Hlavní autor: | |
|---|---|
| Další autoři: | |
| Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
| Jazyk: | Čeština |
| Vydáno: |
2014
|
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/393364/prif_b/ |
| Shrnutí: | V srdci savců jsou exprimovány dvě izoformy těžkého řetězce myozinu - alfa (MHC alfa) a beta (MHC-beta). Jejich poměrná exprese koreluje s frekvencí kontrakce srdce. MHC-alfa je označován jako rychlý myozin s vyšší ATPázovou aktivitou, MHC-beta je označován jako pomalý myozin. Během vývoje a při některých patofyziologických stavech srdce se poměr MHC-alfa/MHC-beta mění. Kvantifikace izoforem je důležitým nástrojem při studiu vývoje srdce a pochopení mechanismů srdečního selhání. Kvůli podobné velikosti proteinů je elektroforetická separace izoforem v jednorozměrném systému poměrně obtížná. Cílem mé práce bylo optimalizovat elektroforetické metody pro separaci izoforem MHC, které jsou přítomny v embryonálních a dospělých myších srdcích a u in vitro diferencovaných kardiomyocytů. Standardní SDS-PAGE se potvrdila jako nedostatečná pro separaci MHC-alfa a MHC beta izoforem. Další použitou metodou byla modifikovaná SDS-PAGE spočívající v odlišném složení gelů a pufrů, která se ukázala jako In the mammalian heart two myosin heavy chain isoforms are expressed - alpha (MHC-alpha) and beta (MHC-beta). Their distribution is correlated to frequency of cardiac contraction. MHC-alpha is known as the fast myosin with higher ATPase activity, MHC-beta is known as the slow myosin. During development and in different pathophysiological conditions of the heart, the ratio of MHC-alpha/MHC-beta changes. Quantification of the isoforms is an important tool in the heart development studies and understanding of the mechanisms of heart failure. Because of similar protein size electrophoretic separation of isoforms in a one-dimensional system is relatively difficult. The aim of this bachelor's thesis was the optimization of electrophoretic methods for the separation of MHC isoforms, which are present in fetal and adult mouse heart and in vitro differentiated cardiomyocytes. Standard SDS-PAGE was proven to be insufficient for the separation of MHC-alpha and MHC-beta isoforms. Next method used |
|---|---|
| Popis jednotky: | Vedoucí práce: Lucia Binó |
| Fyzický popis: | 49 s. : il. |