Porovnání proliferačního testu inkorporace thymidinu s cytometrickým měřením redistribuce intracelulárně vázaného fluorochromu CSFE (carboxyfluorescein succinimidyl) u T lymfocytů
Práce poskytuje komplexní náhled do problematiky proliferačních testů, jež jsou řazeny mezi specializovaná funkční vyšetření v imunologické laboratoři. Práce je především zaměřena na porovnání klasické metody inkorporace radioaktivně značeného thymidinu do DNA dělících se buněk s neradioaktivní meto...
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Thesis Manuscript |
| Language: | Czech |
| Published: |
2014
|
| Subjects: | |
| Online Access: | http://is.muni.cz/th/395043/lf_b/ |
| Summary: | Práce poskytuje komplexní náhled do problematiky proliferačních testů, jež jsou řazeny mezi specializovaná funkční vyšetření v imunologické laboratoři. Práce je především zaměřena na porovnání klasické metody inkorporace radioaktivně značeného thymidinu do DNA dělících se buněk s neradioaktivní metodou cytometrického měření redistribuce intracelulárně vázaného fluorochromu CFSE (karboxyfluorescein succinimidyl ester). Jako standard při vyšetření blastické transformace lymfocytů se již několik desítek let používá radioaktivní metoda inkorporace značeného thymidinu a to především z důvodu své vysoké citlivosti. S rozvojem průtokové cytometrie se v posledních letech začala sledovat proliferační aktivita buněk i jinými technikami, mezi jinými i právě barvením pomocí fluorochromu CFSE. Tato nově využívaná neradioaktivní metoda umožňuje dlouhodobě sledovat dynamiku buněčného dělení, neboť každá další populace dceřiných buněk obsahuje poloviční množství barviva, což se projeví snížením intenz The work provides a comprehensive insight into the proliferation assays, which are classified as specialized functional tests in the immunological laboratory. The work is mainly focused on comparing the classical methods of incorporation of radiolabelled thymidine into DNA of dividing cells with non-radioactive method measurement of intracellular redistribution of bound fluorochrome CFSE (carboxyfluorescein succinimidyl ester) by means of flow cytometry. As standard in the examination of blast transformation of lymphocytes for several decades radioactive labeled thymidine incorporation method is used because of its high sensitivity. Development of flow cytometry field in recent years provide possibility among others also to monitor the proliferative activity of cells by staining with fluorochrome CFSE. This new usage of non-radioactive method allows monitoring of long-term dynamics of cell division, because every other population of daughter cells contains half the amount of the dye, t |
|---|---|
| Item Description: | Vedoucí práce: Olga Tichá |
| Physical Description: | 57 l. |