Molekulární typizace bakterií mléčného kvašení rodu Bifidobacterium
Diplomová práce byla zaměřena na rodovou a druhovou identifikaci a charakterizaci 19 terénních kmenů bifidobakterií, izolovaných z lidské stolice. Bakteriální DNA analyzovaných kmenů byla izolována metodou fenolové extrakce. Pro identifikaci bakterií byla využita rodově specifická PCR se 2 sadami ro...
Uloženo v:
Hlavní autor: | |
---|---|
Další autoři: | |
Typ dokumentu: | VŠ práce nebo rukopis |
Jazyk: | Čeština |
Vydáno: |
2007.
|
Témata: | |
On-line přístup: | http://is.muni.cz/th/67625/prif_m/ |
Shrnutí: | Diplomová práce byla zaměřena na rodovou a druhovou identifikaci a charakterizaci 19 terénních kmenů bifidobakterií, izolovaných z lidské stolice. Bakteriální DNA analyzovaných kmenů byla izolována metodou fenolové extrakce. Pro identifikaci bakterií byla využita rodově specifická PCR se 2 sadami rodově specifických primerů a druhově specifická PCR s 9 sadami druhově specifických primerů. Pro ověření správnosti identifikace byla dále využita metoda restrikční analýzy amplifikované ribozomální DNA (ARDRA) s využitím 4 restrikčních enzymů (BamHI, Sau3AI, Sau96I, NciI). Příbuznost mezi kmeny byla stanovena pomocí molekulárně typizačních metod rep-PCR s primerem (GTG5) a rep-PCR s primerem BOXA1R. Kombinací všech metod byly kmeny zařazeny do druhů: B. animalis, B. bifidum, B. breve, B. longum a B. adolescentis. Pět analyzovaných kmenů nebylo identifikováno jednoznačně. The aim of the work was genus- and species-specific identification of 19 Bifidobacterium strains isolated from human stool samples. Bacterial DNAs were isolated using the phenol extraction method. There were used 2 genus- and 9 species-specific PCRs primers, restriction analysis of amplified ribosomal DNA (ARDRA) using 4 enzymes (BamHI, Sau3AI, Sau96I, NciI), and repetitive element sequence-based PCR (rep-PCR) with primers (GTG)5 and BOXA1R for identification. The analysed strains were identified by combination of all the used methods as the following species: B. animalis, B. bifidum, B. breve, B. longum, and B. adolescentis. Five of the analysed strains were not identified unambiguously. |
---|---|
Popis jednotky: | Vedoucí práce: Alena Španová. |
Fyzický popis: | 85 l. : il. |